[发明专利]OsUGE3基因在改善水稻性状中的应用

权利要求书

1.OsUGE3基因在改善水稻性状中的应用，其特征在于，所述OsUGE3基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述性状为株高、生物量、分蘖数以及抗倒伏能力，所述应用为利用所述OsUGE3基因构建超表达水稻植株。

2.根据权利要求1所述OsUGE3基因在改善水稻性状中的应用，其特征在于，利用所述OsUGE3基因构建超表达水稻植株，包括如下步骤：

用BamHI和XbaI对水稻OsUGE3基因全长CDS序列以及超表达载体pCAMBIA1300s双酶切后，得到酶切后的载体和目的基因片段，通过T4 DNA连接酶连接酶切后的载体和目的基因片段，将连接产物转化至大肠杆菌感受态，确定构建正确的超表达载体，通过农杆菌介导法转染至待转化水稻品系，经选择、分化、生根、炼苗、移栽，获得转基因水稻植株。

3.根据权利要求2所述OsUGE3基因在改善水稻性状中的应用，其特征在于，具体包括如下步骤：

S1，提取水稻mRNA并反转录合成cDNA；

S2，以合成的cDNA为模板，利用特异性引物进行扩增，获得OsUGE3基因全长CDS序列，所述引物序列如下：

正向引物：5’-TTTGGATCCATGGTGAGCGGCGGAGGAGT-3’；

反向引物：5’-AAATCTAGACTAATTCTGCTCAGCATTGG-3’；

S3，用BamH I和XbaI分别对超表达载体pCAMBIA1300s和上述获得的OsUGE3基因的CDS序列片段进行双酶切，酶切后的载体和目的基因片段分别回收，将回收的载体片段和目的基因片段按摩尔浓度比1：3进行混合，在T4 DNA连接酶作用下进行连接，于16℃条件下连接3小时，将构建的连接产物转化大肠杆菌感受态，提取转化后的大肠杆菌质粒进行BamH I和XbaI双酶切鉴定，酶切后获得目的片段大小的载体为构建正确的超表达载体；

S4，将上述构建正确的超表达载体转化农杆菌感受态，提取转化后的农杆菌质粒，将其再次转化大肠杆菌感受态，并提取大肠杆菌质粒进行酶切检测，确定构建正确的超表达载体转入农杆菌中，获得重组农杆菌；

S5，将S4获得的重组农杆菌转染至水稻品系，经选择培养、分化培养、生根培养、炼苗、移栽，获得超表达水稻植株。

4.根据权利要求3所述的OsUGE3基因在改善水稻性状中的应用，其特征在于，S2中，PCR反应扩增体系为：

模板cDNA 5μl；2×KOD buffer 25μl；dNTP 4μl；正向引物1.5μl；反向引物1.5μl；KOD2μl；ddH2O11μl。

5.根据权利要求4所述的OsUGE3基因在改善水稻性状中的应用，其特征在于，PCR反应扩增程序为：

94℃预变性5min；94℃变性30s，53℃退火30s，72℃延伸2min，29次循环；72℃延伸5min。