[发明专利]OsUGE3基因在改善水稻性状中的应用

说明书

本发明涉及生物技术领域，具体涉及OsUGE3基因在改善水稻性状中的应用，所述OsUGE3基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述性状包括株高、生物量、分蘖数以及抗倒伏能力，所述应用为利用所述OsUGE3基因构建超表达水稻植株，并成功构建了超表达OsUGE3基因的水稻，研究显示，超表达OsUGE3基因可显著提高水稻株高、生物量、分蘖数以及抗倒伏能力，这一结果为培育优良性状水稻提供一种全新的并且简单有效的方法。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体涉及OsUGE3基因在改善水稻性状中的应用。

背景技术

多糖是植物细胞壁的主要组份，在维持细胞的形态、机械强度和抗逆性等方面起重要的作用。植物细胞壁多糖由供体单糖在糖基转移酶的作用下合成，其组成结构复杂多变，在不同的物种中或同一物种的不同生长发育阶段都不相同。尽管多个参与细胞壁多糖合成的糖基转移酶已经被鉴定，但其供体单糖的来源机制仍不清楚。UDP-Gal/Glu差向异构酶(UGE)通过催化UDP-葡萄糖和UDP-半乳糖的相互转化，可能为细胞壁多糖的合成以及糖蛋白和糖脂的糖基化修饰提供了供体糖。

尽管据报道UGE的无效突变体显示出植物生长受阻，但是UGE超表达对植物生长的影响仍然未知。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明提供了OsUGE3基因在改善水稻性状中的应用。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

OsUGE3基因在改善水稻性状中的应用，所述OsUGE3基因的核苷酸序列如SEQ IDNO.1所示，所述性状包括株高生物量、分蘖数以及抗倒伏能力，所述应用为利用所述OsUGE3基因构建超表达水稻植株。

进一步的，利用上述OsUGE3基因构建转基因水稻植株，包括如下步骤：

用BamHI和XbaI对水稻OsUGE3基因全长CDS序列以及超表达载体pCAMBIA1300s双酶切后，得到酶切后的载体和目的基因片段，通过T4 DNA连接酶连接酶切后的载体和目的基因片段，将连接产物转化至大肠杆菌感受态，确定构建正确的超表达载体，通过农杆菌介导法转染至待转化水稻品系，经选择、分化、生根、炼苗、移栽，获得超表达水稻植株。

更进一步的，具体包括如下步骤：

S1，提取水稻mRNA并反转录合成cDNA；

S2，以合成的cDNA为模板，利用特异性引物进行扩增，获得OsUGE3基因全长CDS序列，所述引物序列如下：

正向引物：5’-TTTGGATCCATGGTGAGCGGCGGAGGAGT-3’；

反向引物：5’-AAATCTAGACTAATTCTGCTCAGCATTGG-3’；

S3，用BamH I和XbaI分别对超表达载体pCAMBIA1300s和上述获得的OsUGE3基因的CDS序列片段进行双酶切，酶切后的载体和目的基因片段分别回收，将回收的载体片段和目的基因片段按摩尔浓度比1：3进行混合，在T4 DNA连接酶作用下进行连接，于16℃条件下连接3小时，将构建的连接产物转化大肠杆菌感受态，提取转化后的大肠杆菌质粒进行BamH I和XbaI双酶切鉴定，酶切后获得目的片段大小的载体为构建正确的超表达载体。

S4，将上述构建正确的超表达载体转化农杆菌感受态，提取转化后的农杆菌质粒，将其再次转化大肠杆菌感受态，并提取大肠杆菌质粒进行酶切检测，确定构建正确的超表达载体转入农杆菌中，获得重组农杆菌；

S5，将S4获得的重组农杆菌转染至水稻品系，经选择培养、分化培养、生根培养、炼苗、移栽，获得转基因水稻植株。