[发明专利]一种牡丹活体植株挥发性成分的检测方法

权利要求书

1.一种牡丹活体植株挥发性成分的检测方法，其特征在于：包括以下步骤：

步骤一、制作吸附管：取一支外径4-6 mm、长80-100 mm的玻璃空管，清洗干净，烘干；将脱活玻璃毛塞入所述玻璃空管中，填充入40-60mm³的Tenax TA吸附剂，然后依次用100-200μL无水乙醇、100-200 μL二氯甲烷和100-200 μL正戊烷清洗，制成吸附管；

步骤二、选取生长健壮、长势一致、花朵大小适中的牡丹花，分别罩上两端开口、无味透明的采样袋；在所述采样袋上端插入一支活性炭管、下端插入一支步骤一制作的吸附管，所述采样袋上端和下端分别以塑料卡条密封；

步骤三、将QC-1S型大气采样仪架在合适的位置，调整高度，进气口处连接一个玻璃Y管，所述一个玻璃Y管包括一个下管口和两个分支管口；所述下管口通过无味透明的硅胶管与进气口连接；调整大气采样仪的各项参数，控制流速为300-600 mL/min，收集时间为2-4h；

步骤四、将玻璃Y管的两个分支管口分别与牡丹花下端的吸附管通过无味透明的硅胶管相连，打开大气采样仪，开始采样；

步骤五、采样完毕后，取下吸附管，用保鲜膜密封，然后用锡箔纸包裹，置于超低温冰盒带回实验室，完成样品收集；

步骤六、向吸附管中加入正己烷500-1000 μL，把吸附管垂直插入洁净的棕色进样瓶中，用洗耳球在吸附管上端开口反复抽打使得正己烷洗脱吸附管内的吸附剂，得到洗脱液；

步骤七、以氮气吹洗洗脱液，使之浓缩至100-200 μL，置于-20 ℃冰箱保存，待用；

步骤八：打开气质联用仪，设定气相色谱-质谱条件，进样进行检测；

步骤八所述气相色谱-质谱条件分为气相色谱条件和质谱条件；

所述气相色谱条件为：HP-5MS弹性石英毛细管柱；柱流量：0.8 mL/min；柱温：初温70℃，以6 ℃/min的速率升温到160 ℃，再以2 ℃/min的速率升温到180 ℃，然后以5 ℃/min的速率升温到250 ℃，保持10 min；进样口温度250 ℃；载气：高纯氦气，流速0.8 mL/min；进样方式：分流进样；进样量：5 μL；所述HP-5MS弹性石英毛细管柱的规格为0.25 mm×30m、0.25 μm；

所述质谱条件为：EI源：70 eV；接口温度：250 ℃；离子源温度230 ℃；四极杆温度150℃；EM电压1247 V；扫描范围29-450 amu；

通过质谱库检索和人工图谱解析，初开期的‘凤丹’牡丹中鉴定出23种化合物，分别为罗勒烯、十一烷、十二烷、十三烷、十四烷、1，3，5-三甲氧基苯、十五烷、1-十六烯、十六烷、顺-7-十二烯-1-醇醋酸酯、8-十七烯、十七烷、1-十八烯、十八烷、十九烷、邻苯二甲酸二丁酯、反-5-二十烯、棕榈酸异丙酯、二十二烷、二十三烷、二十四烷、二十五烷、二十六烷；

通过质谱库检索和人工谱图解析，初开期的‘春归华屋’牡丹中鉴定出22种化合物，分别为对二甲氧基苯、十二烷、反-2-十四烯、十四烷、十五烷、苯酚2,4-双（1,1-二甲基）、顺-7-十六烯、十六烷、顺-7-十二烯-1-醇醋酸酯、8-十七烯、十七烷、反-3-十八烯、十八烷、十九烷、邻苯二甲酸二丁酯、反-5-二十烯、二十烷、1-二十二烯、二十二烷、二十四烷、二十五烷、邻苯二甲酸二异辛酯。