[发明专利]一种牡丹活体植株挥发性成分的检测方法

说明书

本发明涉及一种牡丹活体植株挥发性成分的检测方法，属于植物成分检测领域，所述方法从花香样品采集和气相色谱‑质谱条件等方面进行优化，适合在近自然条件下多种牡丹品种挥发性成分的定性与定量分析，能够比较真实地反映牡丹花挥发性成分及其释放量。该采集方法携带方便、操作简单、成本较低、容易实现，有效地解决了传统离体测定方法中材料受损后挥发性成分改变、样品无法长时间保存和无法同时进行大量采样的三个问题；自制吸附管使用前无需用活化仪等进行活化，节省时间，节约成本；在该气相色谱‑质谱条件下能够稳定、准确地检测出‘凤丹’牡丹等品种牡丹花的多种挥发性成分及相对含量，适合采用动态顶空吸附法收集的牡丹花香样品的检测。

技术领域

本发明属于植物成分检测技术领域，具体地，涉及一种牡丹活体植株挥发性成分的检测方法。

背景技术

花朵的三个主要观赏特征：花型、花色、花香。其中花香被誉为“花卉的灵魂”，是观赏植物的重要审美指标之一。植物花朵释放的香味可以治疗一些心理和生理疾病，芳香植物中萃取到的芳香化合物在医疗、养生、美容等方面具有重要的应用价值，花香的经济价值日益受到大众追捧。牡丹作为候选国花，是我国特有的芳香植物，素有“花中之王”的美称，以其花大、色艳、香浓而享誉海内外，具有很高的观赏价值。

目前，在芳香植物方面，月季、水仙、蜡梅、玫瑰等植物的香气成分已经确定，但有关牡丹花挥发性成分鉴定的研究报道较少，而这些研究全部采用离体测定的方法，较为常见的有固相微萃取法（SPME）和静态顶空法（SHS）等。传统离体测定方法会使得花瓣受损、香气成分改变。动态顶空吸附法是一种活体植株挥发性成分采样方法，在牡丹香气成分收集中并未见报道。同时，无论是动态顶空吸附法或是其他检测方法，样品的采集是十分关键的。因为牡丹芳香类挥发性成分无法长时间保存，必须在短时间内快速测定，否则会造成成分的损失或改变，影响结果的准确性。而且牡丹株型较大，根系复杂，花期较短，很难大量取样，在样品采集时，由于现有技术的限制，难以规避上述问题。

气质联用技术(GC-MS)是对挥发性化学成分进行分析鉴定的一种有效手段。近年来，气质联用技术在花香研究中的应用日益普遍。周海梅等采用固相微萃取法（SPME）结合气相色谱-质谱（GC-MS）联用技术定性分析不同品种牡丹花的挥发性成分，从10个品种牡丹花中共检出34种成分。李莹莹等采用静态顶空（SHS）-气相色谱-质谱（GC-MS）法分离和鉴定出4个品种牡丹花的30种挥发性成分。但不同的取样方法会使花朵挥发性成分具有差异，气相色谱-质谱条件也要随之改变。

发明内容

为了解决现有技术中的不足，本发明的目的在于提供一种牡丹活体植株挥发性成分的检测方法，所述检测方法从花香样品采集方法和气相色谱-质谱条件等方面进行优化，能够比较真实地反映牡丹花挥发性成分及相对含量，适合在近自然条件下多种品种牡丹花挥发性成分的定性与定量分析。

为了实现上述目的，本发明采用的具体方案为：

一种牡丹活体植株挥发性成分的检测方法，包括以下步骤：

步骤一、制作吸附管：取一支外径4-6 mm、长80-100 mm的玻璃空管，清洗干净，烘干；将脱活玻璃毛塞入所述玻璃空管中，填充入40-60mm³的Tenax TA吸附剂，然后依次用100-200 μL无水乙醇、100-200 μL二氯甲烷和100-200 μL正戊烷清洗，制成吸附管；

步骤二、选取生长健壮、长势一致、花朵大小适中的牡丹花，分别罩上两端开口、无味透明的采样袋；在所述采样袋上端插入一支活性炭管、下端插入一支步骤一制作的吸附管，所述采样袋上端和下端分别以塑料卡条密封；

步骤三、将QC-1S型大气采样仪架在合适的位置，调整高度，进气口处连接一个玻璃Y管，所述一个玻璃Y管包括一个下管口和两个分支管口；所述下管口通过无味透明的硅胶管与进气口连接；调整大气采样仪的各项参数，控制流速为300-600 mL/min，收集时间为2-4 h；