[发明专利]一种大规模细胞培养的方法在审
申请号: | 202010150654.8 | 申请日: | 2020-03-06 |
公开(公告)号: | CN111304151A | 公开(公告)日: | 2020-06-19 |
发明(设计)人: | 李慧伦;方想元;袁晔;袁建华 | 申请(专利权)人: | 广州洁特生物过滤股份有限公司 |
主分类号: | C12N5/071 | 分类号: | C12N5/071 |
代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人: | 许庆胜 |
地址: | 510000 广东省广州*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 大规模 细胞培养 方法 | ||
1.一种大规模细胞培养的方法,其特征在于,包括以下步骤:
步骤1:向培养液收集瓶加入细胞培养液;
步骤2:将细胞通过进液管由进液室接种至动态细胞培养器的培养腔内,启动蠕动泵,将所述细胞培养液充满所述动态细胞培养器,关闭所述蠕动泵,进行静态孵育;
步骤3:启动所述蠕动泵,向所述静态孵育后的所述动态细胞培养器中持续灌注细胞培养液进行动态孵育;
步骤4:将所述动态孵育后的所述动态细胞培养器中的液体通过出液管排出,收集细胞;
步骤3所述蠕动泵的转速为0.1~3rpm。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤3所述蠕动泵的转速为1.5~3rpm。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤3所述动态孵育的时间为48~72h。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤2所述静态孵育的时间为5~8h。
5.根据权利要求1或4所述的方法,其特征在于,所述静态孵育具体为:在所述静态孵育的第1~2h每隔8~30min将所述动态细胞培养器翻转一次。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述培养腔的数量为1~10层。
7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述细胞的接种量为0.5~50×107个。
8.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤2所述蠕动泵的转速为20~100rpm。
9.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤4所述收集细胞使用的胰蛋白酶消化液的体积为20~200mL。
10.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤1所述细胞培养液的体积为100mL~1000mL。
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