[发明专利]一种血清中B族维生素的液相色谱-串联质谱检测方法在审
| 申请号： | 202010150790.7 | 申请日： | 2020-03-06 |
| 公开（公告）号： | CN111398439A | 公开（公告）日： | 2020-07-10 |
| 发明（设计）人： | 权丽 | 申请（专利权）人： | 权丽 |
| 主分类号： | G01N30/02 | 分类号： | G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34 |
| 代理公司： | 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 | 代理人： | 张晓鹏 |
| 地址： | 250000 山东省济*** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 血清 维生素 色谱 串联 检测 方法 | ||
1.一种血清中B族维生素的液相色谱-串联质谱检测方法，其特征在于：包括如下步骤：
对血清样品进行前处理，向血清样品中加入沉淀剂，离心去除蛋白；所述沉淀剂为含有质量分数为10-20％维生素C的甲醇；
向上清液中加入萃取剂，涡旋设定时间，离心后取上清液，萃取剂为含质量分数为10-20％维生素C的10-15mmol/L的醋酸铵溶液；
将上清液过滤后，用液相色谱-质谱联用方法进行检测。
2.根据权利要求1所述的血清中B族维生素的液相色谱-串联质谱检测方法，其特征在于：在对血清样品进行前处理之前，还包括向血清样品中加入内标工作溶液的步骤。
3.根据权利要求1所述的血清中B族维生素的液相色谱-串联质谱检测方法，其特征在于：所述沉淀剂中的维生素C的质量百分数为14％-16％。
4.根据权利要求1所述的血清中B族维生素的液相色谱-串联质谱检测方法，其特征在于：向血清样品中加入沉淀剂后，涡旋，涡旋的转速为1400-1600rpm，涡旋的时间为4-7min。
5.根据权利要求1所述的血清中B族维生素的液相色谱-串联质谱检测方法，其特征在于：离心去除蛋白的步骤中，离心转速为14500-15500rpm，离心时间为4-6min。
6.根据权利要求1所述的血清中B族维生素的液相色谱-串联质谱检测方法，其特征在于：所述醋酸铵溶液中维生素C的质量分数为13-17％。
7.根据权利要求1所述的血清中B族维生素的液相色谱-串联质谱检测方法，其特征在于：醋酸铵溶液中醋酸铵的浓度为12-14mmol/L。
8.根据权利要求1所述的血清中B族维生素的液相色谱-串联质谱检测方法，其特征在于：液相色谱条件为：色谱柱：Eclipse XDB-C18(4.6*150mm，5μm)；流速：0.7ml/min；色谱柱温：40℃；流动相A：10mM醋酸铵溶液；流动相B：含0.1％甲酸的乙腈溶液；进样量30μL。
9.根据权利要求1所述的血清中B族维生素的液相色谱-串联质谱检测方法，其特征在于：液相色谱的梯度洗脱程序为：0-0.5min，流动相A 98％，流动相B 2％；0.5-3.0min，流动相A由98％降为15％；3.0-4.0min，流动相A保持15％；4.0-4.01min，流动相A升为98％，4.01-5.5min，流动相A保持98％。
10.根据权利要求1所述的血清中B族维生素的液相色谱-串联质谱检测方法，其特征在于：质谱条件为：喷雾电压：5500V，温度450℃，雾化气：50L/min，辅助加热气：60L/min，气帘气：20L/min。
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