[发明专利]检测中药产品中多环芳烃标志物的方法

权利要求书

1.一种检测中药产品中多环芳烃标志物的样品前处理方法，所述多环芳烃标志物为苯并[a]蒽、䓛、苯并[a]荧蒽和苯并[a]芘，所述前处理方法包括以下步骤：

1）提取：

将待测中药产品样品、内标溶液和乙醇混合后进行第一超声处理，得到第一混合溶液；

将所述第一混合溶液与水混合后依次进行第一涡旋提取和第二超声处理，得到第二混合溶液；

将所述第二混合溶液和正己烷混合后进行第二涡旋提取，然后经离心，取上层，得到第一正己烷提取液；

2）净化：

将所述第一正己烷提取液进行Florisil柱净化，得到第一净化液；所述Florisil柱净化包括如下步骤：将所述第一正己烷提取液过Florisil柱并收集提取液流出液，然后用第一洗脱液进行洗脱，收集洗脱流出液，将所述提取液流出液与洗脱流出液合并，得到第一净化液；所述第一洗脱液为二氯甲烷-正己烷混合溶液，所述二氯甲烷-正己烷混合溶液中二氯甲烷和正己烷的体积比为2~4:17；所述第一洗脱液的用量为0.5~1.5倍柱体积；

将所述第一净化液进行第一溶剂去除后，将所得第一净化提取物溶解于正己烷中，得到第一净化提取物的正己烷溶液；

将所述第一净化提取物的正己烷溶液进行EU多环芳烃固相萃取柱净化，得到第二净化液；所述EU多环芳烃固相萃取柱的填料为二乙烯基苯聚合物和N-丙基乙二胺；所述EU多环芳烃固相萃取柱净化包括如下步骤：将所述第一净化提取物的正己烷溶液过EU多环芳烃固相萃取柱，然后采用正己烷进行淋洗除杂，再用第二洗脱液对淋洗除杂后的EU多环芳烃固相萃取柱进行洗脱，收集洗脱流出液，得到第二净化液；所述第二洗脱液为二氯甲烷-乙酸乙酯混合溶液，所述二氯甲烷-乙酸乙酯溶液中二氯甲烷和乙酸乙酯的体积比为1~1.5:1，所述第二洗脱液的用量为0.5~1.5倍柱体积，所述淋洗除杂用正己烷的用量为0.5~1.5倍柱体积；

将所述第二净化液中进行第二溶剂去除，得到第二净化提取物。

2.根据权利要求1所述样品前处理方法，其特征在于，所述步骤1）中，待测样品和乙醇的质量体积比为0.1~2.0g:10mL，水和待测样品的体积质量比为10mL:0.1~2.0g，正己烷和待测样品的体积质量比为10mL:0.1~2.0g。

3.根据权利要求1所述样品前处理方法，其特征在于，所述内标溶液为D₁₂-苯并[a]蒽、D₁₂-䓛、D₁₂-苯并[b]荧蒽和D₁₂-苯并[a]芘的混合丙酮溶液。

4.根据权利要求1所述样品前处理方法，其特征在于，所述第一涡旋提取的转速为2500rpm，时间为40~80s。

5.根据权利要求1所述样品前处理方法，其特征在于，所述第二涡旋提取的转速为2500rpm，时间为4~6min。

6.根据权利要求1所述样品前处理方法，其特征在于，所述第一正己烷提取液过Florisil柱时的流速为1~2mL/min，所述第一洗脱液的流速为0.5~2mL/min。

7.根据权利要求1所述样品前处理方法，其特征在于，所述第一净化提取物的正己烷溶液过EU多环芳烃固相萃取柱时的流速为1~2mL/min。

8.一种中药产品中多环芳烃标志物的测定方法，包括以下步骤：

（1）采用权利要求1~7任一项所述的样品前处理方法对待测样品进行样品前处理，得到第二净化提取物；

（2）将所述第二净化提取物溶解于丙酮-异辛烷溶液中，得到待测液；

（3）将所述待测液进行气相色谱-质谱分析，得到质量色谱图；

（4）根据所述质量色谱图，采用标准曲线法，计算多环芳烃标志物的含量。