[发明专利]一种基于胶乳增强免疫比浊法测定ANA的试剂盒及其制备使用方法

说明书

本发明提供了一种基于胶乳增强免疫比浊法测定ANA的试剂盒，包括反应缓冲液R1和胶乳试剂R2；反应缓冲液R1包括缓冲液、无机盐、增浊剂、防腐剂、稳定剂、表面活性剂；胶乳试剂R2包括至少五种通过ANA抗原与胶乳微球偶联而成的胶乳试剂组成液，每种胶乳试剂组成液分别包括胶乳保存液以及保存在胶乳保存液中的ANA抗原标记的胶乳微球；其中，每个胶乳试剂组成液中采用的ANA抗原种类均不同。本发明还提供了一种基于胶乳增强免疫比浊法测定ANA的试剂盒的制备使用方法。本发明的优点在于：可以使用全自动生化分析仪检测ANA，并且操作简便、检测速度快、精密度高、重复性好、检测结果不受操作影响。

技术领域

本发明涉及医学和生物检测试剂制备领域，尤其涉及一种基于胶乳增强免疫比浊法测定ANA的试剂盒及其制备使用方法。

背景技术

自身免疫是机体免疫系统对自身成分发生免疫应答，产生低水平的抗体和致敏淋巴细胞的现象；自身免疫疾病(autoimmune disease，AID)则是由机体自身产生的抗体或致敏淋巴细胞破坏、损伤自身的组织和细胞成分，导致组织损害和器官功能障碍的原发性免疫性疾病，是目前世界上主要的致残性疾病之一。其分类可以归为：①器官特异性，病变局限于特定的器官；②全身性：病变见于多种组织和器官两大类；具有反复发作、慢性迁延、遗传倾向、女性多发等特点。对于自身免疫性疾病的诊断，除症状和体征外，免疫学实验室检查十分重要，而抗核抗体(Autoantibody To Nuclear Antigen，ANA)是AID的重要标志物，是抗核酸(Nucleic acid)和核蛋白(Nucleoprotein)抗体的总称，可分为1、抗DNA抗体；2、抗组蛋白抗体；3、抗非组蛋白抗体；4、抗核仁抗体。对于抗核抗体的检测有助于疾病的诊断：如类风湿性关节炎、干燥综合征、白塞病、皮肌炎、原发性胆汁性肝硬化等，可以观察疾病活动度和治疗反应，研究发病机理。

目前，检测抗核抗体的方法有：间接免疫荧光法、免疫印迹法、酶联免疫法、胶体金法和化学发光法。国内现有9家公司注册的ANA检测试剂盒，胶乳增强比浊法目前还未见到注册上市。相比较比浊法，免疫荧光法需要使用荧光显微镜，酶联免疫法需要用到酶标仪，化学发光法需要使用昂贵的化学发光仪，胶体金法不能定量检测。而基于胶乳增强免疫比浊法测定的ANA试剂盒，可以使用全自动生化分析仪检测ANA，操作简便、检测速度快，并且精密度高、重复性好、检测结果不受操作影响，在临床使用上具体极大的优势。

据此，目前急需一种基于胶乳增强免疫比浊法测定ANA的试剂盒及其制备使用方法。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于提供一种可以使用全自动生化分析仪检测ANA，并且操作简便、检测速度快、精密度高、重复性好、检测结果不受操作影响的基于胶乳增强免疫比浊法测定ANA的试剂盒及其制备使用方法。

本发明采用以下技术方案解决上述技术问题：

一种基于胶乳增强免疫比浊法测定ANA的试剂盒，包括反应缓冲液R1和胶乳试剂R2；

所述反应缓冲液R1包括的成分及相应含量为：缓冲液2-10g/L，无机盐5-30g/L，增浊剂10-50g/L，防腐剂0.1-2.5g/L，稳定剂10-50g/L，表面活性剂0.5-3.0mL/L，溶剂为纯化水；

所述胶乳试剂R2包括至少五种通过ANA抗原与胶乳微球偶联而成的胶乳试剂组成液，每种胶乳试剂组成液分别包括胶乳保存液以及保存在所述胶乳保存液中的ANA抗原标记的胶乳微球；所述胶乳保存液包括的成分及相应含量为：缓冲液5-20g/L，无机盐5-15g/L，稳定剂20-100g/L，防腐剂0.1-2.5g/L，表面活性剂1-5mL/L，溶剂为纯化水；其中，每个所述胶乳试剂组成液中采用的ANA抗原种类均不同。

作为本发明的优选方式之一，在所述反应缓冲液R1中：