[发明专利]一种支原体鉴定琼脂培养基及其制备方法

权利要求书

1.一种支原体鉴定琼脂培养基，其特征在于，按质量百分比计算，该培养基包括以下成分：基础培养基5.2～9.4％，添加剂0.309～0.645％，血清5.0～9.0％，余量为纯化水，其中，所述添加剂内包含有CaCl₂，所述CaCl₂在培养基中的占比为0.04～0.06％。

2.根据权利要求1所述的一种支原体鉴定琼脂培养基，其特征在于，按在培养基中的质量百分占比计算，所述基础培养基包括以下组分：

琼脂粉1.0～1.5％，胰酪胨1.0～1.5％，大豆胨0.3～0.6％，葡萄糖0.3～0.6％，磷酸氢二钾0.3～0.6％，氯化钠0.3～0.6％，酵母提取液2.0～4.0％。

3.根据权利要求2所述的一种支原体鉴定琼脂培养基，其特征在于，按在培养基中的质量百分占比计算，所述添加剂还包括以下组分：

尿素0.12～0.26％，精氨酸0.12～0.26％，酚红0.02～0.05％，青霉素钾0.003～0.005％，氨苄西林钠0.003～0.005％，两性霉素0.003～0.005％。

4.一种如权利要求3所述的支原体鉴定琼脂培养基的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

（1）基础培养基的制备：按比例称取琼脂粉、胰酪胨、大豆胨、磷酸氢二钾、葡萄糖、氯化钠和酵母提取液，直接加入纯化水中，加热使完全溶解，充分混匀后用2mol/ml HCL调节pH值至6.3±0.05，将培养基加热煮沸5分钟后，经121℃、15分钟高压灭菌备用；

（2）添加剂的制备：按比例称取尿素、精氨酸、酚红、青霉素钾、氨苄西林钠、两性霉素、CaCl₂，充分溶解于纯化水中备用；

（3）培养基的配制：在百级洁净条件下，将高压灭菌后的基础培养基冷却至55～56℃，将无菌过滤后的血清加热至55～56℃，按照比例量取血清加入基础培养基中，充分混匀；将经过无菌过滤的添加剂加入基础培养基中，充分混匀，用2mol/ml HCL调节培养基pH值至6.05±0.05；

（4）固体培养基制备：在百级洁净条件下，对培养基进行无菌分装，待培养基充分冷却凝固后，即得到固体培养基。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：所述步骤（3）中，血清和添加剂均采用0.22μm的滤膜进行无菌过滤。