[发明专利]一种用于任意核酸编辑的组合物及方法有效
申请号: | 202010157724.2 | 申请日: | 2020-03-09 |
公开(公告)号: | CN111172164B | 公开(公告)日: | 2022-11-15 |
发明(设计)人: | 徐澍;周国华;邹秉杰 | 申请(专利权)人: | 中国药科大学 |
主分类号: | C12N15/113 | 分类号: | C12N15/113;C12N9/22;C12N15/90 |
代理公司: | 南京天华专利代理有限责任公司 32218 | 代理人: | 傅婷婷;徐冬涛 |
地址: | 210009*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 任意 核酸 编辑 组合 方法 | ||
1.对任意核酸实施靶向切割的组合物在制备基因编辑试剂中的应用,所述的基因编辑为针对基因组DNA或转录组mRNA的编辑,其特征在于所述的组合物包括两个主要组分:
组分A:寡核苷酸探针:寡核苷酸探针由两部分组成,一部分与靶标核酸底物互补,另一部分具有茎-环核酸结构;寡核苷酸探针数量为1条或2条;
组分B:核酸内切酶分子:AfuFEN、PfuFEN、MjaFEN、MthFEN、Homo SapiensFEN中任意一种的部分功能域或全酶片段。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于所述寡核苷酸探针与靶标核酸底物互补部分的长度在11 nt以上。
3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于当寡核苷酸探针数量为一对时,一对核苷酸探针长度方向为3’端与3’端相对,或者为5’端与5’端相对。
4.对任意核酸实施靶向切割的组合物在基因编辑中的应用,所述的基因编辑为针对基因组DNA或转录组mRNA的编辑,且所述的基因编辑不以疾病诊断和或治疗为目的,其特征在于所述的组合物包括两个主要组分:
组分A:寡核苷酸探针:寡核苷酸探针由两部分组成,一部分与靶标核酸底物互补,另一部分具有茎-环核酸结构;寡核苷酸探针数量为1条或2条;
组分B:核酸内切酶分子:AfuFEN、PfuFEN、MjaFEN、MthFEN、Homo SapiensFEN中任意一种的部分功能域或全酶片段。
5.一种基因编辑方法,所述的基因编辑为针对基因组DNA或转录组mRNA的编辑,所述的基因编辑方法不以疾病治疗为目的,其特征在于根据靶多核苷酸,设计并合成权利要求1-3中任一项所述的寡核苷酸探针,向含有靶多核苷酸的体系中加入所述的寡核苷酸探针和权利要求1-3中任一项所述的核酸内切酶分子,所述的核酸内切酶分子识别寡核苷酸探针的二级结构从而与探针结合形成复合物,该复合物识别靶多核苷酸并对其实现切割。
6.根据权利要求5所述的对任意靶多核苷酸编辑方法,其特征在于所述的基因组DNA或转录组mRNA选自哺乳动物基因组DNA或转录组mRNA、大肠杆菌基因组DNA或转录组mRNA、斑马鱼基因组DNA或转录组mRNA、植物基因组DNA或转录组mRNA。
7.根据权利要求6所述的对任意靶多核苷酸编辑方法,其特征在于所述的寡核苷酸探针的条数为1条或以上。
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