[发明专利]橡胶树炭疽病病原菌暹罗炭疽菌的快速分子检测方法与应用

权利要求书

1.鉴定橡胶树炭疽病病原菌暹罗炭疽菌(Colletotrichum siamense)的专用引物，是由序列1和序列2组成的引物对。

2.权利要求1所述的专用引物在鉴定橡胶树炭疽病病原菌暹罗炭疽菌(Coletotrichumsiamense)中的应用。

3.一种鉴定橡胶树炭疽病病原菌暹罗炭疽菌(Coletotrichum siamense)的方法，包括下述步骤：

(1)以待测样品DNA为模板，用权利要求1所述的引物进行PCR扩增；

(2)鉴定步骤(1)所述的PCR扩增产物的大小，将扩增产物中含有一个416bp的DNA特异性扩增片段的待测样品鉴定为暹罗炭疽菌(Coletotrichum siamense)。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：所述PCR扩增的反应体系为25μL，包括：待测样品DNA，上游正向引物和下游反向引物的浓度均为0.4μmoll^-1，dNTP 0.2μmoll^-1,2.5μL含15mM MgCL₂的10×PCR缓冲液；Taq DNA聚合酶添加终浓度为0.04U/μL，加双蒸水补足到25μL。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，PCR反应程序为：95℃预变性3min；94℃变性30s，66℃退火30s,72℃延伸45s，30个循环；72℃延伸5min。

6.一种鉴定橡胶树炭疽病病原菌暹罗炭疽菌(Colletotrichum siamense)的试剂盒，包括权利要求1所述的鉴定橡胶树炭疽病病原菌暹罗炭疽菌(Colletotrichum siamense)的专用引物。

7.根据权利要求6所示的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒中还包括PCR反应试剂。