[发明专利]一种从金钗石斛中提取化合物的工艺及应用

权利要求书

1.一种从金钗石斛中提取化合物的工艺，包括以下步骤：

A)将金钗石斛粉碎，用1～3倍体积的乙醇水溶液浸提2～5次，所得浸提液过滤后合并浓缩，得到浸膏A；

B)将所述浸膏A与水制备成混悬液，依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇进行萃取，筛选三种萃取液后，将乙酸乙酯萃取液浓缩制成浸膏B；

C)取浸膏B，过减压柱，经石油醚和乙酸乙酯混合洗液梯度洗脱，然后用丙酮冲柱，收集流分，将所得各个流分浓缩合并，最终获得16个流分，记为Fr.1～Fr.16；

D)将流分Fr.13过反相柱，以质量浓度30～100％的甲醇水溶液进行梯度洗脱，得到14个流分，记为Fr.13-1～Fr.13-14；

E)取流分Fr.13-7过葡聚糖凝胶柱，以甲醇和氯仿的混合液进行洗脱，得到18个流分，记为Fr.13-7-1～Fr.13-7-18，合并Fr.13-7-15～Fr.13-7-17流分，经半制备HPLC纯化，在t_R＝13.5min得到式I所示化合物，在t_R＝16.4min得到式II所示化合物；

2.根据权利要求1所述的工艺，其特征在于，所述步骤B)中浸膏A与水的体积比为1：(0.5～2)；

所述浸膏A与石油醚的体积比为1：(0.5～2)；所述浸膏A与乙酸乙酯的体积比为1：(0.5～2)；所述浸膏A与正丁醇的体积比为1：(0.5～2)。

3.根据权利要求1所述的工艺，其特征在于，所述步骤C)中石油醚和乙酸乙酯混合洗液的梯度洗脱具体为：石油醚和乙酸乙酯的体积比在80～120小时内由20：1均匀降至0:1。

4.根据权利要求1所述的工艺，其特征在于，所述步骤C)将得到的各个流分减压浓缩，经过薄层层析点板检测，根据显色合并相似流分。

5.根据权利要求1所述的工艺，其特征在于，所述步骤D)中梯度洗脱具体为：依次以质量浓度30％、40％、50％、60％、70％、80％、90％和100％的甲醇水溶液进行洗脱，每个洗脱梯度的洗脱时间相等，洗脱总时间为24～48小时。

6.根据权利要求1所述的工艺，其特征在于，所述步骤E)中甲醇与氯仿的体积比为1：(0.5～2)。