[发明专利]培美曲塞酸中2-氨基-4,6-二羟基嘧啶及4-氨基-2,6-二羟基嘧啶的检测方法

说明书

本发明公开了一种培美曲塞酸中2‑氨基‑4,6‑二羟基嘧啶及4‑氨基‑2,6‑二羟基嘧啶的检测方法。该方法以Acclaim RSLC120 C18为色谱柱，采用LC‑MS检测方法对培美曲塞酸中杂质2‑氨基‑4,6‑二羟基嘧啶及4‑氨基‑2,6‑二羟基嘧啶进行定性和定量，并进行了方法学验证，经实验证明，该方法具有专属性强、快速、灵敏、准确等优点。本发明首次建立了一种培美曲塞酸中杂质2‑氨基‑4,6‑二羟基嘧啶及4‑氨基‑2,6‑二羟基嘧啶的定性和定量方法，便于对培美曲塞酸的质量进行控制，从而提高了培美曲塞二钠的用药安全性。

技术领域

本发明涉及一种培美曲塞酸中2种杂质(2-氨基-4,6-二羟基嘧啶及4-氨基-2,6-二羟基嘧啶)的检测方法，属于医药技术领域。

背景技术

培美曲塞酸是培美曲塞二钠的中间体，培美曲塞二钠(Pemetrexed Disodium)是礼来公司推出的一种抗癌新药，2004年2月被美国FDA批准与顺铂联用治疗一种罕见的癌症——恶性胸膜间皮瘤，同年10月FDA又以快速审批的方式批准培美曲塞二钠作为局部晚期肺癌或转移性非小细胞肺癌的二线治疗。目前，已在全球60多个国家和地区上市。培美曲塞二钠联合顺铂用于治疗无法手术的恶性胸膜间皮瘤。培美曲塞通过运载叶酸的载体和细胞膜上的叶酸结合蛋白运输系统进入细胞内。一旦培美曲塞进入细胞内，它就在叶酰多谷氨酸合成酶的作用下转化为多谷氨酸的形式。多谷氨酸存留于细胞内成为胸苷酸合成酶和甘氨酰胺核苷酸甲酰转移酶的抑制剂而在正常组织内浓度很低。多谷氨酸化代谢物在肿瘤细胞内的半衰期延长，从而也就延长了药物在肿瘤细胞内的作用时间。

2-氨基-4,6-二羟基嘧啶及4-氨基-2,6-二羟基嘧啶是培美曲塞酸生产过程中的副产物，均具警示结构可能存在遗传毒性，因此应制定2-氨基-4,6-二羟基嘧啶及4-氨基-2,6-二羟基嘧啶在培美曲塞酸中的检测方法，对培美曲塞酸的质量进行控制。但经检索，目前尚无关于2-氨基-4,6-二羟基嘧啶及4-氨基-2,6-二羟基嘧啶在培美曲塞酸中的含量检测方法的报道。

培美曲塞酸，英文名称：Pemetrexed disodium，分子式：C₂₀H₂₁N₅O₆；分子量：427.417，结构式如下所示：

2-氨基-4,6-二羟基嘧啶，英文名称：2-amino-4,6-dihydroxypyrimidine，分子式：C₄H₅N₃O₂；分子量：127.10，结构式如下所示：

4-氨基-2,6-二羟基嘧啶，英文名称：4-amino-2,6-dihydroxypyrimidine，分子式：C₄H₅N₃O₂；分子量：127.10，结构式如下所示：

发明内容

针对上述问题，本发明首次提供了一种培美曲塞酸中杂质2-氨基-4,6-二羟基嘧啶及4-氨基-2,6-二羟基嘧啶的检测方法。该方法以Acclaim RSLC120 C18为色谱柱采用LC-MS检测方法对培美曲塞酸中杂质2-氨基-4,6-二羟基嘧啶及4-氨基-2,6-二羟基嘧啶进行定性、定量，并进行了方法学验证。经实验证明，该方法具有专属性强、快速、灵敏、准确等优点，能够可靠地对培美曲塞酸中杂质2-氨基-4,6-二羟基嘧啶及4-氨基-2,6-二羟基嘧啶进行定性定量分析。