[发明专利]一种H9亚型禽流感病毒分离鉴定方法

权利要求书

1.一种H9亚型禽流感病毒分离方法，其特征在于，它包括：

将病毒样品经终浓度6-12μg/ml的胰酶孵育10-20min后，接种于悬浮MDCK细胞，培养4-6天。

2.如权利要求1所述的分离方法，其特征在于：所述培养环境温度为37摄氏度。

3.如权利要求1所述的分离方法，其特征在于：所述培养环境中CO₂浓度为5％。

4.如权利要求1所述的分离方法，其特征在于：所述培养的持续时间是5天。

5.一种H9亚型禽流感病毒分离鉴定方法，其特征在于，它包括：

将病毒样品经终浓度6-12μg/ml的胰酶孵育10-20min后，接种于悬浮MDCK细胞，培养4-6天后，取细胞液进行HA试验；

HA试验中，样品HA效价不低于4log2，则为阳性。

6.如权利要求5所述的分离鉴定方法，其特征在于：

当HA试验中样品HA效价不低于4log2时，再将检测HA为阳性的细胞液稀释为2log2单位的抗原进行HI试验；

所述HI试验使用的阳性血清包括H9亚型禽流感阳性血清和其他血清；

所述其他血清为：鸡新城疫、H5亚型禽流感、H7亚型禽流感和产蛋下降综合征阳性血清中的一种或一种以上；

当H9亚新禽流感阳性血清HI效价不低于4log2，且其他血清HI效价低于4log2，则鉴定为H9亚型禽流感。

7.如权利要求5或6所述的分离鉴定方法，其特征在于：

当HA试验中样品HA效价不低于4log2时，再使用PCR或DNA测序对细胞液中的病毒类型进行验证。

8.如权利要求5或6所述的分离鉴定方法，其特征在于：所述培养环境温度为37摄氏度。

9.如权利要求5或6所述的分离鉴定方法，其特征在于：所述培养环境中CO₂浓度为5％。

10.如权利要求5或6所述的分离鉴定方法，其特征在于：所述培养的持续时间是5天。