[发明专利]一种风铃草的植株再生方法

说明书

本发明公开了一种风铃草的植株再生方法，该方法包括：一、制备外植体备用；二、将外植体置于培养基中，避光条件下培养，获得愈伤组织；三、将愈伤组织经继代培养后转入光下培养；四、转绿后的愈伤组织转接到芽分化培养基上培养，分离不定芽接种至生根培养基上培养，得到组培苗；五、将组培苗移栽于基质中，温室生长，得到风铃草植株。本发明的方法简单易行，成本低廉，管理方便。与现有种子繁殖相比，本发明的方法克服了播种后不易栽培管理，人工栽培中萌发率低、成苗少现象。同时，大大可以缩短生长周期，提高繁殖率，在较短的时间内提供规格一致、便于栽培管理的优质种苗。

技术领域

本发明属于植物培养技术领域，具体涉及一种风铃草的植株再生方法。

背景技术

风铃草(Campanula medium L.)，又名钟花、瓦筒花。其株形粗壮，花朵钟状似风铃，既可作盆花，也可用于露地花境，园林用途十分广泛，极具观赏价值。该种花卉在我国尚处于引种阶段。风铃草一般用播种繁殖，但其种子细小、发芽时间长，幼叶生长缓慢，生长周期较长，且次年才可开花。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于针对上述现有技术的不足，提供一种风铃草的植株再生方法。该方法简单易行，成本低廉，管理方便。与现有种子繁殖相比，该方法克服了播种后不易栽培管理，人工栽培中萌发率低、成苗少现象。同时，大大可以缩短生长周期，提高繁殖率，在较短的时间内提供规格一致、便于栽培管理的优质种苗。

为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是：一种风铃草的植株再生方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤一、将风铃草种子用无菌水浸泡，待种子长出胚根后，将露出胚根的种子用0.2％H₂O₂灭菌2min～3min，然后将灭菌后的种子接种于水琼脂培养基上萌发，得到带有子叶和幼嫩真叶的幼苗，切下子叶或幼嫩真叶作为外植体备用；

或者将风铃草种子播种于装有85wt％泥炭、10wt％珍珠岩和5wt％蛭石的混合基质的育苗盆中萌发，得到带有子叶和幼嫩真叶的幼苗，将幼苗用75％的酒精浸泡30s，用无菌水漂洗，再用10％的NaClO灭菌5min，无菌水冲洗，无菌吸水纸吸干表面水分，切下子叶或幼嫩真叶作为外植体备用；

步骤二、将步骤一中所述外植体置于含有TDZ、NAA和BA的MS培养基中，在避光条件下培养20天，获得愈伤组织；

步骤三、将步骤二中所述愈伤组织经继代培养后转入光下培养，见光三天后愈伤组织开始转绿，继续见光培养；

步骤四、将步骤三中转绿后的愈伤组织转接到芽分化培养基上培养，分化出丛生不定芽，待不定芽长大至1cm～1.5cm时，分离不定芽并将分离的不定芽接种至生根培养基上进行生根培养，得到组培苗；

步骤五、将步骤四中所述组培苗移栽于草炭和沙的基质中，温室生长，得到风铃草植株。

上述的一种风铃草的植株再生方法，其特征在于，步骤一中所述水琼脂培养基中琼脂的含量为6g/L。

上述的一种风铃草的植株再生方法，其特征在于，步骤二中含有TDZ、NAA和BA的MS培养基中TDZ的含量为1.5mg/L，NAA的含量为0.3mg/L，BA的含量为1.5mg/L。

上述的一种风铃草的植株再生方法，其特征在于，步骤三中所述继代培养的时间为9天。

上述的一种风铃草的植株再生方法，其特征在于，步骤四中所述芽分化培养基为含有NAA和6-BA的MS培养基，芽分化培养基中NAA的含量为0.03mg/L，6-BA的含量为0.5mg/L。