[发明专利]化合物proximicin及其制备方法和应用

权利要求书

1.化合物proximicin G，其结构如下所示：

2.一种重组菌株Verrucosispora sp.SCSIO 40062/pIB139，其保藏编号为：GDMCCNo.60976。

3.一种化合物proximicin F，diproximicin A和proximicin G的制备方法，其特征在于，化合物proximicin F和diproximicin A是从权利要求2所述的重组菌株Verrucosispora sp.SCSIO 40062/pIB139的AM6-4培养基发酵培养物中分离得到的；而化合物proximicin G是从权利要求2所述的重组菌株Verrucosispora sp.SCSIO 40062/pIB139的AM6培养基发酵培养物中分离得到的；

所述的化合物proximicin F，diproximicin A和proximicin G的结构式如下所示：

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，具体步骤为：将重组菌株Verrucosispora sp.SCSIO 40062/pIB139分别用AM6-4和AM6培养基发酵培养，获得发酵培养物，离心分离分别收集发酵液和菌丝体，发酵液用大孔树脂XAD-16吸附，然后用丙酮洗脱；菌丝体用甲醇浸提并超声破碎细胞，两者回收有机溶剂后剩余的水相用乙酸乙酯萃取，减压浓缩至干，分别得到重组菌株Verrucosispora sp.SCSIO 40062/pIB139的AM6-4培养基粗提物EX1和AM6培养基粗提物EX2；将粗提物EX1经正相硅胶柱层析分离，用氯仿/甲醇作为洗脱剂从氯仿、氯仿/甲醇4:1、氯仿/甲醇2:1、甲醇，v/v进行梯度洗脱，依次得到流份Fr1-Fr4，将氯仿/甲醇2:1，v/v洗脱的流份Fr3用凝胶柱层析，以氯仿/甲醇1:1，v/v为洗脱剂进行分离，洗脱流份经纯化得到化合物proximicin F和diproximicin A；将粗提物EX2经正相硅胶柱层析分离，用氯仿/甲醇作为洗脱剂从氯仿、氯仿/甲醇4:1、氯仿/甲醇2:1、甲醇，v/v进行梯度洗脱，依次得到流份Fr1-Fr4，将氯仿/甲醇4:1，v/v洗脱的流份Fr2和氯仿/甲醇2:1，v/v洗脱的流份Fr3合并后用凝胶柱层析进行分离，洗脱流份经纯化得到化合物proximicin G。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，重组菌株Verrucosispora sp.SCSIO40062/pIB139的发酵培养方法为：将活化的重组菌株Verrucosispora sp.SCSIO 40062/pIB139接入放线菌一号培养基中，28℃，200rpm培养4d后得到种子液；将种子液以10％，v/v的接种量分别接入AM6-4和AM6发酵培养基中，28℃，200rpm培养5-7d后得到发酵培养物；

每升放线菌一号培养基：可溶性淀粉10g，酵母浸膏4g，细菌学蛋白胨2g，海盐30g，加纯净水至1L，pH7.2-7.4；

每升AM6-4培养基：甘油10g，细菌学蛋白胨5g，甘氨酸0.1g，L-丙氨酸0.1g，异亮氨酸0.1g，CaCO₃ 5g，海盐30g，加纯净水至1L，pH7.0；

每升AM6培养基：可溶性淀粉20g，葡萄糖10g，细菌学蛋白胨5g，酵母浸膏5g，CaCO₃ 5g，海盐30g，加纯净水至1L，pH7.0。

6.权利要求1中的proximicin G在制备抗菌药物中的应用。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述的抗菌药物是抗枯草芽孢杆菌的药物。

8.权利要求2所述的重组菌株Verrucosispora sp.SCSIO 40062/pIB139在制备化合物proximicin F，diproximicin A和/或proximicin G中的应用；

所述的化合物proximicin F，diproximicin A和proximicin G的结构式如下所示：