[发明专利]一种透明质酸片段的新应用及稳定制造方法

权利要求书

1.一种透明质酸片段的新应用，其特征在于，所述透明质酸片段为使用结构上有两个结合区的透明质酸酶PH20足量或轻度过量充分酶解高或中分子量透明质酸原料制造而成的平均分子量35±8KDa的透明质酸片段；

所述应用为：

所述透明质酸片段作为人中性粒细胞移走抑制剂的应用；

和/或所述透明质酸片段作为人单个核细胞移走抑制剂的应用；

和/或所述透明质酸片段作为人单个核细胞凋亡促进剂的应用；

和/或所述透明质酸片段作为人中性粒细胞β防卫素分泌促进剂的应用。

2.一种透明质酸片段的新应用，其特征在于，所述透明质酸片段为使用结构上有两个结合区的透明质酸酶PH20足量或轻度过量充分酶解高或中分子量透明质酸原料制造而成的平均分子量35±8KDa的透明质酸片段；

所述应用为：

所述透明质酸片段在制备治疗中性粒细胞移走相关炎症性疾病药物中的应用；

和/或所述透明质酸片段在制备治疗人单个核细胞移走相关炎症性疾病药物中的应用；

和/或所述透明质酸片段在制备治疗人单个核细胞凋亡相关炎症性疾病药物中的应用；

和/或所述透明质酸片段在制备人中性粒细胞β防卫素治疗的炎症性疾病药物中的应用。

3.根据权利要求1或2所述的新应用，其特征在于，所述人单个核细胞凋亡为人淋巴细胞凋亡。

4.一种透明质酸片段的稳定制造方法，其特征在于，使用结构上有两个结合区的透明质酸酶PH20足量或轻度过量充分酶解高或中分子量透明质酸原料制造平均分子量35±8KDa的透明质酸片段；酶解时间为10-20分钟。

5.一种透明质酸酶注射液及透明质酸注射液的联合应用方法，其特征在于，所述透明质酸酶注射液为结构上有两个结合区的透明质酸酶PH20的注射液，所述透明质酸注射液为高或中分子量透明质酸的注射液；

透明质酸酶注射液及透明质酸注射液在注射前预混10-20分钟，使透明质酸酶PH20足量或轻度过量充分酶解高或中分子量透明质酸制造成平均分子量35±8KDa的透明质酸片段。

6.根据权利要求1-3任一项所述的新应用，或权利要求4所述的稳定制造方法，或权利要求5所述的联合应用方法，其特征在于，所述足量或轻度过量充分酶解为：

(1)10-20分钟足量或轻度过量充分酶解中和高分子透明质酸原料制造的透明质酸片段的分子量和1-6小时足量或轻度过量充分酶解中和高分子透明质酸原料制造的透明质酸片段的分子量基本一致，变异系数CV15％；

(2)99％高或中分子透明质酸原料被足量或轻度过量充分酶解的低分子透明质酸片段产物被022um滤膜全部顺利滤过；

(3)透明质酸酶活性经足量或轻度过量充分酶解反应后没有残留或少量残留，残留量15％，80度45分钟可以全部灭活。

7.根据权利要求1-3任一项所述的新应用，或权利要求4所述的稳定制造方法，或权利要求5所述的联合应用方法，其特征在于，所述透明质酸酶PH20为重组人透明质酸酶PH20或牛睾丸透明质酸酶PH20；

所述高分子透明质酸的分子量为1600kDa；所述中分子透明质酸的分子量为300kDa；所述透明质酸片段的平均分子量为35±8KDa。

8.根据权利要求7所述的新应用或制造方法或联合应用方法，其特征在于，所述透明质酸片段的平均分子量为35±8kDa。

9.根据权利要求7所述的新应用或制造方法或联合应用方法，其特征在于，足量或轻度过量充分酶解高分子量透明质酸时，所述透明质酸酶PH20的用量为20000U/g；

足量或轻度过量充分酶解中分子量透明质酸时，所述透明质酸酶PH20的用量为5000U/g。