[发明专利]一种Bet V1重组蛋白及其制备方法和应用

说明书

本发明提供了一种Bet V1重组蛋白及其制备方法和应用，所述Bet V1重组蛋白的编码基因包括如SEQ ID NO:1所示的核酸序列。所述Bet V1重组蛋白的编码基因经过密码子优化，经人工合成后亚克隆至原核载体得到重组载体，采用原核表达系统表达制备，有利于实现BetV1重组蛋白在原核表达系统中的高效表达。

技术领域

本发明属于基因工程技术领域，涉及一种Bet V1重组蛋白及其制备方法和应用，尤其涉及一种白桦树主要组分过敏原Bet V1重组蛋白及其制备方法和应用。

背景技术

近年来，过敏性疾病的发病率不断升高，成为重要的公共健康问题。过敏性疾病在各个年龄阶段均有可能发生，其中由血清IgE介导的I型超敏反应是产生过敏性疾病的重要途径，具有明显的遗传倾向性。过敏性疾病主要包括皮肤过敏反应、呼吸道过敏反应、消化道过敏反应甚至过敏性休克等。

白桦树是一种造成I型过敏反应的重要过敏原，可以引起过敏性鼻结膜炎、支气管哮喘等症状，主要含有Bet V1、Bet V2、Bet V4和Bet V6等四种致敏组分过敏原，其中，BetV1为最主要的组分过敏原。多种与Bet V1具有较高同源性且有交叉反应的蛋白也是重要的组分过敏原，如壳斗目中的恺木、榛子，水果中的苹果、樱桃、梨，以及蔬菜中的胡萝卜和芹菜等。因此，Bet V1在过敏诊断和脱敏治疗中具有广泛的应用前景。

因此，研究一种经济、有效的制备Bet V1组分过敏原的方法在过敏性疾病诊断和治疗领域具有重要意义。

发明内容

针对现有技术的不足和实际需求，本发明提供了一种Bet V1重组蛋白及其制备方法和应用，所述Bet V1重组蛋白的编码基因经过密码子优化，采用原核表达系统表达制备，产量高、成本低，具有广阔的应用前景。

为达此目的，本发明采用以下技术方案：

第一方面，本发明提供了一种编码Bet V1重组蛋白的核酸分子，所述核酸分子包括如SEQ ID NO:1所示的核酸序列；

SEQ ID NO:1：

ATGGGCGTGTTTAACTATGAAACCGAAACCACCAGCGTGATTCCGGCGGCGCGCCTGTTTAAAGCGTTTATTCTGGATGGCGATAACCTGTTTCCGAAAGTGGCGCCGCAGGCGATTAGCAGCGTGGAAAACATTGAAGGCAACGGCGGCCCGGGCACCATTAAAAAAATTAGCTTTCCGGAAGGCTTTCCGTTTAAATATGTGAAAGATCGCGTGGATGAAGTGGATCATACCAACTTTAAATATAACTATAGCGTGATTGAAGGCGGCCCGATTGGCGATACCCTGGAAAAAATTAGCAACGAAATTAAAATTGTGGCGACCCCGGATGGCGGCAGCATTCTGAAAATTAGCAACAAATATCATACCAAAGGCGATCATGAAGTGAAAGCGGAACAGGTGAAAGCGAGCAAAGAAATGGGCGAAACCCTGCTGCGCGCGGTGGAAAGCTATCTGCTGGCGCATAGCGATGCGTATAAC。

本发明中，根据白桦树主要组分过敏原Bet V1的mRNA序列，进行原核表达系统密码子优化，密码子优化主要通过调整GC含量、mRNA二级结构等，利用在线密码子优化工具(https://www.vectorbuilder.cn/tool/codon-optimization.html)，得到适用于大肠杆菌表达系统的编码Bet V1重组蛋白的核酸分子，所述核酸分子经人工合成后亚克隆至原核载体得到重组载体，有利于实现Bet V1重组蛋白在大肠杆菌表达系统中的高效表达。

第二方面，本发明提供了一种重组载体，所述重组载体包括如第一方面所述的核酸分子。

本发明中，重组载体具有多克隆位点，是一种可以调控外源基因表达的分子生物学载体。