[发明专利]一种氨基酸类冷冻保存液在干细胞冻存中的应用

权利要求书

1.一种氨基酸类冷冻保存液在干细胞冷冻保存中的应用，其特征在于，每100 mL所述氨基酸类冷冻保存液中含有：氨基酸类仿生控冰材料 0.1-50g，多元醇 5.0-45 mL，DMSO0-15 mL，血清或人血清白蛋白或牛血清白蛋白 0-30 mL，水溶性糖 0.1-1mol L^-1，缓冲液余量；

所述氨基酸类仿生控冰材料选自聚-L-精氨酸，所述聚-L-精氨酸的聚合度为8~15；

所述冷冻保存液的pH为6.5-7.6。

2.根据权利要求1所述的氨基酸类冷冻保存液在干细胞冷冻保存中的应用，其特征在于，所述多元醇为碳原子数为2-5的多元醇。

3.根据权利要求2所述的氨基酸类冷冻保存液在干细胞冷冻保存中的应用，其特征在于，所述多元醇选自乙二醇，丙二醇，丙三醇中的任一种。

4.根据权利要求1所述的氨基酸类冷冻保存液在干细胞冷冻保存中的应用，其特征在于，所述水溶性糖为非还原性双糖、水溶性多糖、糖酐中的至少一种。

5.根据权利要求4所述的氨基酸类冷冻保存液在干细胞冷冻保存中的应用，其特征在于，所述水溶性糖选自蔗糖、海藻糖、水溶性纤维素、聚蔗糖。

6.根据权利要求1所述的氨基酸类冷冻保存液在干细胞冷冻保存中的应用，其特征在于，所述缓冲液选自DPBS或hepes-buffered HTF缓冲液或其他细胞培养缓冲液中的至少一种。

7.根据权利要求1所述的氨基酸类冷冻保存液在干细胞冷冻保存中的应用，其特征在于，每100 mL冷冻保存液中所述DMSO含量为1.0-10mL。

8.根据权利要求1所述的氨基酸类冷冻保存液在干细胞冷冻保存中的应用，其特征在于，每100 mL冷冻保存液中所述血清或人血清白蛋白或牛血清白蛋白含量为10-15 mL。

9.根据权利要求1所述的氨基酸类冷冻保存液在干细胞冷冻保存中的应用，其特征在于，每100 mL冷冻保存液中所述水溶性糖含量为0.1-0.8 mol L^-1。

10.根据权利要求1所述的氨基酸类冷冻保存液在干细胞冷冻保存中的应用，其特征在于，每100 mL冷冻保存液中所述多元醇含量为5.0-40mL。

11.根据权利要求1所述的氨基酸类冷冻保存液在干细胞冷冻保存中的应用，其特征在于，每100 mL所述冷冻保存液还含有0.1-6.0 g的聚乙烯醇PVA。

12.根据权利要求1-11任一项所述氨基酸类冷冻保存液在干细胞冷冻保存中的应用，所述氨基酸类冷冻保存液由如下方法制备得到，所述制备方法包括如下步骤：

（1）将所述氨基酸类仿生控冰材料溶解于部分缓冲液，调节pH后形成溶液1；任选地，将PVA溶解于部分缓冲液中，调节pH后得到溶液2；

（2）将水溶性糖溶解于部分的缓冲液中，待水溶性糖全部溶解后加入其他组分，制得溶液3；

（3）待溶液1、任选地溶液2、和溶液3冷却至室温后混合，调节pH并用缓冲液定容至预定体积，得到所述冷冻保存液；

任选地，当所述冷冻保存液含有血清或人血清白蛋白或牛血清白蛋白时，所述血清或人血清白蛋白或牛血清白蛋白在所述冷冻保存液使用时添加。

13.根据权利要求1-11所述的氨基酸类冷冻保存液在干细胞冷冻保存中的应用，其特征在于，所述干细胞选自全能干细胞、多能干细胞或者专能干细胞中任一种。

14.据权利要求13所述的氨基酸类冷冻保存液在干细胞冷冻保存中的应用，所述干细胞选自胚胎干细胞、各类间充质干细胞、造血干细胞。