[发明专利]超高效液相色谱串联质谱技术检测血清中12种类固醇激素的方法

说明书

本发明涉及一种超高效液相色谱串联质谱技术检测血清中12种类固醇激素的方法，将血清样本与所有待测物的混合内标溶液混合，通过一步液‑液萃取获得待测溶液；通过在流动相中添加电解质氟化铵，可有效提高某些目标化合物的离子化效率；再采用质谱正‑负切换扫描模式同时检测12种激素，检测种类多，灵敏度高、特异性强、成本低且前处理过程简单，无需固相萃取或衍生，5.0min之内可完成12种激素的分离和检测，为临床上内分泌疾病的健康评估提供一种可靠的检测方法。

技术领域

本发明属于血液检测技术领域，具体涉及一种超高效液相色谱串联质谱技术检测血清中12种类固醇激素的方法。

背景技术

类固醇激素是一类脂溶性的小分子激素，又称为甾体激素。它们是由胆固醇经过一系列的酶催化代谢产生的，在调节机体新陈代谢、免疫调节、性功能调节，生长发育等方面起到重要的作用。类固醇激素按照生理功能可分为孕激素、盐皮质激素、糖皮质激素、雌激素和雄激素。孕酮、皮质酮、醛固酮属于盐皮质激素，17α-羟孕酮和皮质醇属于糖皮质激素，雌酮和雌二醇属于雌激素，硫酸脱氢表雄酮、脱氢表雄酮、睾酮、双氢睾酮和雄烯二酮均属于雄激素。

孕酮(P4)又被称为黄体酮，来源是肾上腺、黄体和胎盘。孕酮检测可以确定排卵期，评估不孕、评估子宫异常出血、高危妊娠胎盘健康状况等。孕酮病理性增高可见于妊娠毒血症、先兆子痫、原发性高血压、先天性17-羟孕酮生成障碍等；孕酮病理性降低见于先兆流产、宫外孕、早产、闭经、胎儿发育迟缓、死胎、不孕症、黄体功能不全、肾上腺或甲状腺功能严重失调等。17α-羟孕酮和孕酮是其它类固醇激素的前提物质，其含量增多有助于受孕。

醛固酮(ALD)是一种盐皮质激素，主要作用于肾脏，进行钠离子及水份的再吸收。整体来说，醛固酮为一种增进肾脏对于离子及水分再吸收作用的一种激素，为肾素-血管紧张素系统的一部分。醛固酮增高见于原发性醛固酮增多症，其降低见于肾上腺皮质功能降低、原发性单一醛固酮减少症、高钠饮食、自主神经功能紊乱、妊娠高血压综合征等。

皮质醇(F)是一种糖皮质激素，也是身体中最重要的抗压力应激激素，保护身体免受过度压力损害。皮质醇会提高血糖水平，给身体提供逃避伤害所需的能量，同时与胰岛素协同工作为细胞提供产生能量所需的葡萄糖。高皮质醇含量的人，免疫能力非常弱，因为皮质醇可抑制大多数免疫细胞，特别是白细胞。总之，皮质醇通过两种相反但又相互联系的调节活动来维持生命：一是释放并激活身体的防御机制；二是关闭和调节同样的机制保护防止反应过头而引起细胞损害或死亡。

硫酸脱氢表雄酮(DHEA-S)主要由肾上腺皮质分泌，卵巢也会少量分泌，是所有性激素的前驱物质。研究显示DHEA-S具有抗衰老、维持心血管健康、降低血脂、降低血压、提升免疫系统功能、增强骨骼、使皮肤光滑细致、增强记忆力、增加活力等功效。DHEA-S在20-30岁之间处于峰值，随着年龄的增长会显著下降。

睾酮(T)主要由卵巢及肾上腺分泌，其含量增高多见于特发性性早熟(男性患儿可达成人水平)，肾上腺增生(男性患儿)，肾上腺皮质肿瘤，女性睾酮增多会出现多毛、痤疮、月经稀少或不孕等。睾酮可直接或先转变为活性更强的双氢睾酮(DHT)，与生精细胞的雄激素受体结合，促进精子的生成，还可刺激生殖器官的发育，促进男性第二性征出现并维持其正常形态。在男性成年后，双氢睾酮如果过量，将会产生诸如青春痘，脱发等病理现象。此外，中老年前列腺增生也与双氢睾酮有着密切的关系。

雄烯二酮(AD)是一种雄激素，具有激素原的特性，主要用于评估肾上腺、卵巢或睾丸功能。在男性，90％由肾上腺皮质分泌。在女性雄烯二酮的50％来自卵巢、50％来自肾上腺。女性的雄烯二酮过高可能引起雄激素过多症。成年男性雄烯二酮测定水平略低同龄女性，显著增高可能表明肾上腺皮质增生和性腺肿瘤。