[发明专利]超高效液相色谱串联质谱技术检测血清中9种水溶性维生素的试剂盒

权利要求书

1.一种超高效液相色谱串联质谱技术检测血清中9种水溶性维生素的试剂盒，

所述9种水溶性维生素分别为：维生素B1、维生素B2、维生素B3、维生素B5、维生素B6、维生素B7、维生素B12、5-甲基四氢叶酸和维生素C；

所述的试剂盒包含如下试剂：

(1)洗脱液：

洗脱液A：0.01～0.5％甲酸-1～10mM甲酸铵水溶液；洗脱液B：甲醇；

(2)校准品溶液：

将包含有1000ng/mL维生素B1、1000ng/mL维生素B2、4000ng/mL维生素B3、8000ng/mL维生素B5、2000ng/mL维生素B6、100ng/mL维生素B7、250ng/mL维生素B12、4000ng/mL5-甲基四氢叶酸和1000000ng/mL维生素C的混合标准S0溶液以空白血清基质溶液配制成七个不同浓度点的校准品溶液，所述校准品溶液的七个浓度点为：

维生素B1和维生素B2的浓度相同，依次为0.4ng/mL、1ng/mL、2ng/mL、5ng/mL、10ng/mL、25ng/mL和50ng/mL；

维生素B3和5-甲基四氢叶酸的浓度相同，依次为1.6ng/mL、4ng/mL、8ng/mL、20ng/mL、40ng/mL、100ng/mL和200ng/mL；

维生素B5的浓度依次为3.2ng/mL、8ng/mL、16ng/mL、40ng/mL、80ng/mL、200ng/mL和400ng/mL；

维生素B6的浓度依次为0.8ng/mL、2ng/mL、4ng/mL、10ng/mL、20ng/mL、50ng/mL和100ng/mL；

维生素B7的浓度依次为0.04ng/mL、0.1ng/mL、0.2ng/mL、0.5ng/mL、1ng/mL、2.5ng/mL和5ng/mL；

维生素B12的浓度依次为0.1ng/mL、0.25ng/mL、0.5ng/mL、1.25ng/mL、2.5ng/mL、6.25ng/mL和12.5ng/mL；

维生素C的浓度依次为400ng/mL、1000ng/mL、2000ng/mL、5000ng/mL、10000ng/mL、25000ng/mL和50000ng/mL；

(3)混合内标工作液：

包含有10ng/mL维生素B1-13C4、20ng/mL维生素B2-13C4,15N2、20ng/mL维生素B3-13C3,15N、40ng/mL维生素B5-13C3,15N、10ng/mL维生素B6-d3、2ng/mL维生素B7-d4、2ng/mL维生素B12-15N6、50ng/mL 5-甲基四氢叶酸-13C,d3和5000ng/mL维生素C-13C6；

(4)蛋白质沉淀剂：甲醇；

(5)质控品：

含有9种水溶性维生素的空白血清基质溶液，分为低、中、高三个浓度，分别为QC(L)、QC(M)和QC(H)，其中：

QC(L)为所述混合标准S0溶液以空白血清基质溶液稀释至1000倍；

QC(M)为所述混合标准S0溶液以空白血清基质溶液稀释至200倍；

QC(H)为所述混合标准S0溶液以空白血清基质溶液稀释至20倍。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，

所述洗脱液A为0.1～0.5％甲酸-1～5mM甲酸铵水溶液；优选为0.1％甲酸-2mM甲酸铵水溶液。

3.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，

所述空白血清基质为0.05～0.5％甲酸-5～20％甲醇水溶液；优选为0.1～0.5％甲酸-5～15％甲醇水溶液；更优选为0.1％甲酸-10％甲醇水溶液。