[发明专利]超高效液相色谱串联质谱技术检测血清中9种水溶性维生素的试剂盒

说明书

本发明涉及一种超高效液相色谱串联质谱技术检测血清中9种水溶性维生素的试剂盒，将血清样本与所有待测物的混合内标溶液混合，样本无需衍生化处理，前处理简单，只需一步蛋白沉淀处理，样本用量小，灵敏度高，特异性强，检测种类较多，5分钟之内可同时检测9种水溶性维生素，可用于临床上血清水溶性维生素的诊断及健康评估。

技术领域

本发明属于血液检测技术领域，具体涉及一种超高效液相色谱串联质谱技术检测血清中9种水溶性维生素的试剂盒。

背景技术

水溶性维生素是能在水中溶解的一组维生素，常是辅酶或辅基的组成部分。主要包括B族维生素和维生素C。其中，B族维生素包括维生素B1(Thiamine，VB1)、维生素B2(Riboflavin，VB2)、维生素B3(Nicotinamide，VB3)、维生素B5(Pantothenic acid，VB5)、维生素B6(Pyridoxic Acid，VB6)、维生素B7(Biotin，VB7)、维生素B12(Cyanocobalamin，VB12)和5-甲基四氢叶酸(5-methyl tetrahydrofolic acid，5-MTHF)。

维生素B1即硫胺素，在糖代谢中起到重要作用。硫胺素缺乏会导致糖代谢障碍，使血液中丙酮酸和乳酸含量增多，影响神经组织供能，产生脚气病。主要表现为肌肉虚弱、萎缩，小腿沉重、下肢水肿、心力衰竭等。维生素B2又叫核黄素，是体内许多重要辅酶类的组成成分，能促进生长发育，保护眼睛、皮肤的健康，缺乏会引起皮炎，口角炎，舌炎，唇裂症，脂溢性皮炎，阴囊炎等。维生素B3又称为烟酸，有助于促进消化系统健康，改善肠胃功能障碍和腹泻；有助于降低血液中胆固醇和甘油三酯水平；医学上还用于改善口腔炎，防止口臭。维生素B5又叫泛酸、抗压维生素，因为它有助于肾上腺素的产生，从而有效缓解压力和疲劳。泛酸与维生素C一起食用，还有助于保持肌肤活力，加快伤口愈合。维生素B6又叫吡哆素，在蛋白质的代谢过程中起调控作用，它有助于能量的产生，让人感觉精力充沛，被称为提神营养素。吡哆酸是维生素B6的主要代谢产物，是在肝脏醛氧化酶的作用下产生的。维生素B9又叫叶酸，是一种重要的维生素，它与B12一起有利于血红细胞形成，减少贫血。孕妇缺乏叶酸会导致胎儿的脊柱裂和无脑畸形。此外，叶酸还有助于保持血液正常的同型半胱氨酸水平(衡量心脏病的重要指标)，减少心脏病的发生。5-甲基四氢叶酸是血清中叶酸的主要存在形式，为活性叶酸。维生素B12又叫钴胺素，可以促进血红细胞形成和再生，减少恶性贫血；可以消除烦躁，帮助集中注意力和增强记忆力；有助于儿童生长发育，增进食欲。

维生素C又叫L-抗坏血酸，是一种水溶性维生素，主要作用是提高免疫力，预防癌症、心脏病、中风，保护牙齿和牙龈等。

目前，有关水溶性维生素的检测方法有很多种，如微生物检测法、ELISA、放射免疫分析，蛋白质结合或生物传感器等方法。微生物检测方法适用于检测多种衍生物的总和(如总叶酸)，其它方法在代谢物的区分上存在相同的缺点。而液相色谱串联质谱法(LC-MS/MS)能够区分开天然维生素及其代谢产物，灵敏度高，特异性强，非常适用于血清或血浆中多种水溶性维生素的检测。但是，目前的LC-MS/MS技术检测水溶性维生素时仍然存在诸多问题，如灵敏度不够、前处理复杂和样本用量大等。