[发明专利]胰岛素样生长因子结合蛋白-3化学发光检测试剂盒及其制备方法

说明书

本发明公开了一种胰岛素样生长因子结合蛋白‑3化学发光检测试剂盒及其制备方法，属于免疫医学检测技术领域，试剂盒包括：R1试剂：包被链霉亲和素的磁珠溶液；R2试剂：吖啶酯标记的IGFBP‑3抗体溶液；R3试剂：生物素标记的IGFBP‑3抗体溶液。本试剂盒采用一步法夹心法的反应模式，采用吖啶酯化学发光免疫分析法，与碱性磷酸酶比较吖啶酯的发光效率高，且发光体系简单，不需要加入催化剂，本底低，标记简单等优势，同时采用链霉亲和素‑生物素体系比较磁珠包被体系，与现有磁珠体系相比，反应体系信号进一步放大，提高试剂灵敏度，可特异性检测人体内IGFBP‑3，为临床诊断提供更为精确、灵敏、更具针对性的体外诊断试剂。

技术领域

本发明涉及免疫医学检测技术领域，尤其涉及一种胰岛素样生长因子结合蛋白-3化学发光检测试剂盒及其制备方法。

背景技术

胰岛素样生长因子结合蛋白-3(insμlin-like growth factor bindingprotein3，IGFBP-3)，是一种主要由肝脏合成和分泌，包含264个氨基酸，相对分子质量约为28.7KDa，存在于血清中的含量丰富的IGF结合蛋白。

IGFBP-3在血液循环中主要以两种复合体形式存在：一种为大分子量(150KDa)三聚体，由分子量为39-42KDa的IGFBP-3，GH依赖的不耐酸的亚单位(ALS)及IGF-I/II构成。它携带约80％的IGFs，主要存在于血液循环中。另一种为小分子量(40KDa)二聚体，由IGFBP-3和IGF-I/II组成，能通过毛细血管屏障，转运至IGFs的靶细胞。因此IGFBP-3在转运IGFs、延长其半衰期，调节IGFs与其受体间的相互作用等方面发挥了重要的生理作用。

血清IGFBP-3的水平主要受GH和IGF-I的调节。同样的，血清IGF-I和IGFBP-3水平反映了健康儿童内源性的生长激素分泌。在生长激素缺乏症患者血清IGF-I、IGFBP-3显著低于正常儿童,可作为筛选由GH-IGF轴异常引起生长发育迟缓的潜在指标。在矮小儿童中，如果IGFBP-3低下，则GH激发试验的反应同样低下；但IGFBP-3正常也不能完全排除生长激素缺乏症(GHD),因此IGFBP-3的测定，加上临床分析，生长发育测量和GH的测定，能够大大提高GHD诊断的准确性。因此检测患者血清和血浆中胰岛素样生长因子结合蛋白-3水平对于生长激素缺乏症(GHD)的诊断非常重要。

目前用于检测IGFBP-3的常用分析方法主要为免疫层析法，与免疫层析法相比，化学发光免疫分析法具有灵敏度高、检测线性范围宽、操作简便，自动化程度高等优势。市面上IGFBP-3化学发光定量检测试剂盒仅西门子公司生产的Immulite2000胰岛素样生长因子结合蛋白-3试剂盒，该试剂盒采用鼠单克隆抗IGFBP-3抗体包被磁珠及碱性磷酸酶标记的鼠单克隆抗IGFBP-3抗体的夹心法检测人体内IGFBP-3的含量，然而，碱性磷酸酶发光体系，需要加入催化剂，本底较高，灵敏度达不到要求，并且IGFBP-3在辅助诊断生长紊乱的地位愈发重要。因此，研制一种新型的IGFBP-3化学发光检测试剂盒十分必要。

发明内容

本发明针对上述技术问题，提供一种胰岛素样生长因子结合蛋白-3化学发光检测试剂盒及其制备方法，提高试剂的灵敏度及精确性。

本发明的目的是提供一种胰岛素样生长因子结合蛋白-3化学发光检测试剂盒。

本发明的另一目的是提供上述胰岛素样生长因子结合蛋白-3化学发光检测试剂盒的制备方法。

为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种胰岛素样生长因子结合蛋白-3化学发光检测试剂盒，包括：R1试剂：包被链霉亲和素的磁珠溶液；R2试剂：吖啶酯标记的IGFBP-3抗体溶液；R3试剂：生物素标记的IGFBP-3抗体溶液。

其中：