[发明专利]分离纯化胎儿有核红细胞的试剂盒有效
申请号: | 202010186566.3 | 申请日: | 2016-07-11 |
公开(公告)号: | CN111500534B | 公开(公告)日: | 2022-11-29 |
发明(设计)人: | 夏庆杰;杨林;杨雪飞 | 申请(专利权)人: | 山东亚大药业有限公司 |
主分类号: | C12N5/078 | 分类号: | C12N5/078 |
代理公司: | 北京天昊联合知识产权代理有限公司 11112 | 代理人: | 高钊;王静 |
地址: | 252000 *** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 分离 纯化 胎儿 红细胞 试剂盒 | ||
1.一种从怀孕15-21周的孕妇外周静脉血样中分离纯化胎儿有核红细胞的试剂盒,其中包括:
红细胞裂解液,用于对孕妇外周静脉血样中的无核红细胞进行裂解处理,其中所述红细胞裂解液为PBS配制的0.7-1.5%NH4Cl溶液,其中所述红细胞裂解液的用量为:相对于1ml的血样添加1ml-4ml的该裂解液,其中0.7-1.5%的单位是w/v%;
细胞固定化试剂,用于对裂解后获得的有核细胞进行固定化处理,其中所述细胞固定化试剂为PBS配制的1-3%戊二醛溶液,以及其中所述细胞固定化试剂的用量为:相对于经裂解处理过的血样中的固体物质添加0.5-3ml的该固定化试剂,其中1-3%的单位是v/v%;
CD45抗体标记磁珠,用于对血样中细胞进行负筛选,以将非有核红细胞除去;
CD71抗体标记磁珠,用于进行初次正筛选;
抗体洗脱液,用于将初次正筛选磁珠上的细胞洗脱下来,其中所述的抗体洗脱液为pH为11.5以上的碱性缓冲溶液;以及
HBG1抗体标记磁珠,用于对洗脱下的细胞进行再次正筛选。
2.根据权利要求1所述的试剂盒,还包括:
FITC标记的兔抗人CD71 IgG,和
Cy3-标记的兔抗人HBG1 IgG。
3.根据权利要求1所述的试剂盒,其中CD71抗体和HBG1抗体是荧光标记的,并且两种抗体的荧光颜色不同。
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