[发明专利]细菌快速检测方法及试剂

权利要求书

1.一种细菌快速检测方法，其特征在于，所述方法包括：

(1)以细菌的16S rRNA或其PCR扩增产物作为测定靶标，设计捕获探针和检测探针；所述的捕获探针是针对每种细菌的16S rRNA或其PCR扩增产物特异性的探针，且其分别附着于微球上；所述的检测探针是与各细菌的16S rRNA或其PCR扩增产物上共有序列互补的探针，且其包括一可检测标记物；所述的微球分别携带不同的微球识别信号；(2)将附着有(1)的捕获探针的微球、检测探针以及经细胞裂解处理的待测样品混合；从而使待测样品中的特定细菌的16S rRNA或其PCR扩增产物，与该特定细菌相应的捕获探针和微球，以及检测探针形成“微球-捕获探针-特定细菌的16S rRNA或其PCR扩增产物-检测探针”复合物；

(3)检测(2)形成的复合物中不同微球的微球识别信号以及可检测标记物，从而确定待测样品中各待测细菌的存在与否以及存在的量；

其中，

所述细菌包括大肠杆菌、小肠结肠炎耶尔森氏菌、金黄色葡萄球菌、蜡样芽孢杆菌、单核细胞增生李斯特氏菌、志贺氏菌、沙门氏菌、阪崎肠杆菌、变形杆菌、副溶血弧菌、空肠弯曲菌、创伤弧菌；针对各细菌的捕获探针的序列是SEQ ID NO:68～SEQ ID NO:74、78-81或其互补序列；大肠杆菌与志贺氏菌共用捕获探针SEQ ID NO:69或其互补序列；检测探针的序列包括SEQ ID NO:75、82-83或其互补序列；或

所述细菌包括大肠杆菌、小肠结肠炎耶尔森氏菌、金黄色葡萄球菌、蜡样芽孢杆菌、单核细胞增生李斯特氏菌，针对各细菌的捕获探针的序列依次是SEQ ID NO:59～SEQ ID NO:63或其互补序列；检测探针的序列是SEQ ID NO:64和/或SEQ ID NO:67或其互补序列；其辅助序列为SEQ ID NO:65和SEQ ID NO:66或其互补序列；或

所述细菌包括大肠杆菌、志贺氏菌、沙门氏菌、阪崎肠杆菌、小肠结肠炎耶尔森氏菌、变形杆菌、副溶血弧菌、单核细胞增生李斯特氏菌、金黄色葡萄球菌、空肠弯曲菌、蜡样芽胞杆菌、创伤弧菌，针对各细菌的捕获探针的序列依次是SEQ ID NO:45～SEQ ID NO:56或其互补序列；检测探针的序列是SEQ ID NO:57或其互补序列；其辅助序列为SEQ ID NO:58或其互补序列；或

所述细菌包括大肠杆菌、志贺氏菌、沙门氏菌、阪崎肠杆菌、小肠结肠炎耶尔森氏菌、变形杆菌、副溶血弧菌、创伤弧菌，针对各细菌的捕获探针的序列依次是SEQ ID NO:1～SEQID NO:8或其互补序列；检测探针的序列是SEQ ID NO:9或其互补序列；其辅助序列为SEQID NO:10或其互补序列；或

所述细菌包括大肠杆菌、志贺氏菌、沙门氏菌、阪崎肠杆菌、小肠结肠炎耶尔森氏菌、变形杆菌、副溶血弧菌、创伤弧菌，针对各细菌的捕获探针的序列依次是SEQ ID NO:11～SEQID NO:18或其互补序列；检测探针的序列是SEQ ID NO:19或其互补序列；其辅助序列为SEQID NO:20或其互补序列；或

所述细菌包括小肠结肠炎耶尔森氏菌、变形杆菌、副溶血弧菌、单核细胞增生李斯特氏菌、金黄色葡萄球菌、空肠弯曲菌、蜡样芽胞杆菌、创伤弧菌，针对各致病菌的捕获探针的序列依次是SEQ ID NO:21～SEQ ID NO:28或其互补序列；检测探针的序列是SEQ ID NO:29或其互补序列；其辅助序列为SEQ ID NO:30或其互补序列

所述细菌包括大肠杆菌、志贺氏菌、沙门氏菌、阪崎肠杆菌、小肠结肠炎耶尔森氏菌、变形杆菌、副溶血弧菌、单核细胞增生李斯特氏菌、创伤弧菌、金黄色葡萄球菌、空肠弯曲菌、蜡样芽胞杆菌，针对各细菌的捕获探针的序列依次是SEQ ID NO:31～SEQ ID NO:42或其互补序列；检测探针的序列是SEQ ID NO:43或其互补序列；其辅助序列为SEQ ID NO:44或其互补序列；或

所述细菌包括单核细胞增生李斯特氏菌、蜡样芽胞杆菌、金黄色葡萄球菌、空肠弯曲菌，针对各细菌的捕获探针的序列依次是SEQ ID NO:78～SEQ ID NO:81或其互补序列；检测探针的序列是SEQ ID NO:82～SEQ ID NO:83或其互补序列。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述的待测样品仅进行细胞裂解处理，不包括PCR扩增或细胞增殖的步骤。