[发明专利]一种顶空固相微萃取结合气相色谱-质谱联用检测甘蓝叶片挥发性成分的方法

权利要求书

1.一种顶空固相微萃取结合气相色谱-质谱联用检测甘蓝叶片挥发性成分的方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)样品前处理：将存放在液氮中的甘蓝叶片样品取出后迅速研磨至匀浆状态，称取1.0～3.5g匀浆置于顶空瓶中，加入0.3～0.5μg内标物2-辛醇，密封瓶口；

(2)顶空固相微萃取：将内装有样品的顶空瓶在50～70℃平衡10～20min，然后将SPME针管插入顶空瓶内，推出萃取头，并使萃取头处于样品之上，再次萃取30～40min，萃取完立即将萃取头插入到气相色谱-质谱联用仪进样口，250℃解析3～5min；

(3)气相色谱-质谱联用：对甘蓝叶片挥发性成分进行定性和定量分析。

2.根据权利要求1所述的顶空固相微萃取结合气相色谱-质谱联用检测甘蓝叶片挥发性成分的方法，其特征在于，在密封瓶口之前，向所述顶空瓶中加入1～3ml超纯水和0.5～1.5g氯化钠。

3.根据权利要求1所述的顶空固相微萃取结合气相色谱-质谱联用检测甘蓝叶片挥发性成分的方法，其特征在于，在密封瓶口之前，所述顶空瓶内装有磁力搅拌转子，将顶空瓶置于恒温金属磁力搅拌器上进行平衡。

4.根据权利要求1所述的顶空固相微萃取结合气相色谱-质谱联用检测甘蓝叶片挥发性成分的方法，其特征在于，所述气相色谱条件：

色谱柱：DB-WAX弹性石英毛细管柱，30m×0.25mm，0.25μm；进样口温度：250℃；载气：纯度≥99.999％的高纯氦气，柱流速1.0mL/min；进样方式：不分流进样；程序升温：初始温度40℃，保持5min，以5℃/min升温至100℃，再以8℃/min升温至150℃，最后以10℃/min升温至210℃，保持5min。

5.根据权利要求1所述的顶空固相微萃取结合气相色谱-质谱联用检测甘蓝叶片挥发性成分的方法，其特征在于，所述质谱条件：

电离方式：电子电离(EI)；电子能量：70eV；离子源温度：230℃；检测器温度：250℃；扫描方式：全扫描；扫描质量范围m/z：33～500amu；四级杆温度：180℃。

6.根据权利要求1所述的顶空固相微萃取结合气相色谱-质谱联用检测甘蓝叶片挥发性成分的方法，其特征在于，所述萃取头为50/30μm DVB/CAR/PDMS固相微萃取头，且使用之前在250℃条件下老化1h。

7.根据权利要求1所述的顶空固相微萃取结合气相色谱-质谱联用检测甘蓝叶片挥发性成分的方法，其特征在于，甘蓝叶片挥发性成分的定性分析经计算机质谱工作站的自动解卷积系统(AMDIS)和标准质谱库(NIST 14)对照分析完成。

8.根据权利要求1所述的顶空固相微萃取结合气相色谱-质谱联用检测甘蓝叶片挥发性成分的方法，其特征在于，甘蓝叶片挥发性成分的定量分析采用内标物定量分析法，计算公式如下：

挥发性物质含量/(μg/kg)＝(A₁/A₂)×(M₁/M₂)×1000，式中：A₁为待测物质峰面积；A₂为内标物峰面积；M₁为内标物质量/μg；M₂为样品质量/g。