[发明专利]PTH稀土检测试剂盒及检测卡及其微球及制备与检测方法

权利要求书

1.稀土纳米荧光微球，其特征在于：为核壳结构钕掺杂氟化钆镥包覆氟化钇钠，粒径为40nm～60nm，其组成为：

NaGd_xLu_1-y-xF4:_yNd@NaYF₄，其中，NaGd_xLu_1-xF₄为基质，掺杂离子为Nd³⁺；冒号“:”表示为钕掺杂；x和y为稀土离子掺杂摩尔百分数，x的范围为20％～90％，y的范围为1％～10％；NaYF₄为壳层，@表示NaYF₄包覆在NaGd_xLu_1-y-xF₄:_yNd表面；所述稀土纳米荧光微球在基态下稳定，在800～1000nm的激发光源作用下发射出波长范围在1000～1100nm的荧光；

所述稀土纳米荧光微球的制备方法包括以下步骤：

步骤一：合成钕掺杂氟化钆镥：在容器中，加入油酸、1-十八烯、钆的硝酸盐或醋酸盐或氯化物、钕的硝酸盐或醋酸盐或氯化物、镥的硝酸盐或醋酸盐或氯化物、NaOH和氟化铵甲醇混合溶液，并进行反应；随后用环己烷乙醇混合液洗涤，分散于环己烷中，得到NaGd_xLu_1-y-xF₄:_yNd纳米探针环己烷溶液；

步骤二：制备稀土纳米荧光微球：在容器中，加入油酸、1-十八烯、醋酸钇、NaOH和氟化铵甲醇混合溶液、NaGd_xLu_1-y-xF₄:_yNd纳米探针环己烷溶液，并进行反应，用环己烷乙醇混合液洗涤3～4次，分散于环己烷中；用酸洗法将探针转移至水相，再在探针表面修饰羧基，得到水溶性NaGd_xLu_1-y-xF₄:_yNd@NaYF₄稀土纳米荧光微球；

步骤三：活化稀土纳米荧光微球：对步骤二的稀土纳米荧光微球进行超声波处理和离心处理，对沉淀物用10～100mM，pH为5.0～7.0的MES溶液洗涤；加入碳二亚胺、N-羟基硫代琥珀酰亚胺，混匀后高速离心，对沉淀物用pH为5.0～7.0的MES溶液洗涤，即得到活化稀土纳米荧光微球。

2.PTH稀土检测卡，其特征在于包括：

底衬；作为所述PTH稀土检测卡的基底；

包被膜；设置于所述底衬上表面的中部；

样品垫；搭接设置于所述包被膜的上表面的一端；

吸水纸；搭接设置于所述包被膜的上表面的另一端；

其中，所述样品垫靠近包被膜的一端喷涂有微球线，所述微球线为由权利要求1所述的稀土纳米荧光微球标记的PTH单克隆抗体；所述包被膜上依次设置有检测线和质控线，所述检测线靠近所述样品垫；所述检测线包被有PTH单克隆抗体，质控线包被有羊抗鼠IgG抗体。

3.根据权利要求2所述的PTH稀土检测卡，其特征在于：所述样品垫上喷涂的稀土纳米荧光微球标记的PTH单克隆抗体的含量为50～200μg抗体/200μl荧光微球。

4.根据权利要求3所述的PTH稀土检测卡，其特征在于：所述检测线中PTH单克隆抗体包被浓度为0.1～2mg/ml、用量为0.5～1.5μl包被液量/cm膜，所述质控线中羊抗鼠IgG抗体包被浓度为0.5～2mg/ml、用量为0.5～1.5μl包被液量/cm膜。