[发明专利]一种盐酸尼卡地平葡萄糖注射液中5-羟基甲基糠醛杂质和杂质I的检测方法

说明书

本发明属于药物分析技术领域，具体涉及一种盐酸尼卡地平葡萄糖注射液中5‑羟基甲基糠醛杂质和杂质I的检测方法。所述的检测方法采用离子对双波长高效液相色谱法进行测定。本方法操作简便，能够准确测定盐酸尼卡地平葡萄糖注射液中的5‑羟基甲基糠醛和杂质I等有关物质。

技术领域

本发明属于药物分析技术领域，具体涉及一种盐酸尼卡地平葡萄糖注射液中5-羟基甲基糠醛杂质和杂质I的检测方法。

背景技术

盐酸尼卡地平主要抑制心肌与血管平滑肌的胯膜钙离子内流，但不会改变血钙浓度，其葡萄糖注射液临床适用于手术时异常心绞痛和高血压的急救处置，本品在降压的同时可显著改善患者的心、肾功能且不影响心率。

盐酸尼卡地平类注射剂见光易分解，生成无药理活性的尼卡地平降解杂质I；另外葡萄糖类注射剂易由葡萄糖原料引入的毒性杂质5-羟甲基糠醛。它易由己糖(葡萄糖、果糖等单糖)与氨基酸在高温、酸性条件或微生物的作用下脱水而生成，并会对人体横纹肌及内脏产生损害。

盐酸尼卡地平葡萄糖注射液为药典收载品种，现行国家药品标准——《中华人民共和国药典》(以下简称《中国药典》)2015年版二部，其有关物质项目与人用药品注册技术要求国际协调会(ICH)分别制订的原料药、制剂杂质研究指导原则(ICH Q3A，ICH Q3B)要求有较大差距，除了未控制降解杂质I和毒性杂质5-甲基糠醛之外，标准单个杂质(降解杂质和副产物杂质)和总杂质限度分别为2.0％和4.0％，这对于药品注射剂的安全性来说过于宽松，对患者用药产生较大的安全风险。

发明内容

为了解决现行国家标准分析方法中缺少对5-羟基甲基糠醛和杂质I等有关物质的控制和检测的实际问题，本发明提供了一种盐酸尼卡地平葡萄糖注射液相关上述毒性杂质的检测方法。

本发明提供的盐酸尼卡地平葡萄糖注射液中5-羟基甲基糠醛杂质和杂质I等有关物质的检测方法，采用离子对双波长高效液相色谱法进行测定，色谱条件如下：

色谱柱：采用C18硅烷键和硅胶为固定相；

流动相：离子对3.4g·L^-1硫酸四丁基氢铵溶液-甲醇-乙腈(60:30:10)；其中硫酸四丁基氢铵是离子对试剂。

检测波长：5-羟甲基糠醛为284nm、杂质I等有关物质为236nm；

柱温箱温度：35℃；

流速：1.0mL·min^-1；

进样量：20μL。

优选地，所述色谱柱为：Kromasil 100-5C18(250mm×4.6mm)。

优选地，所述检测方法的5-羟甲基糠醛的检测限为0.002μg·mL^-1；盐酸尼卡地平杂质Ⅰ的检测限为0.05μg·mL^-1；盐酸尼卡地平的检测限为0.03μg·mL^-1。

优选地，所述检测方法的5-羟甲基糠醛的定量限为0.007μg·mL^-1；盐酸尼卡地平杂质Ⅰ的定量限为0.15μg·mL^-1；盐酸尼卡地平的定量限为0.10μg·mL^-1。

优选地，避光操作取盐酸尼卡地平葡萄糖注射液。

优选地，所述检测方法，包括以下步骤：

(1)样品制备

精密称取5-羟甲基糠醛、盐酸尼卡地平杂质Ⅰ和盐酸尼卡地平各适量分别至量瓶中，用流动相稀释至刻度；再各精密量取适量至容量瓶中，用流动相稀释成混合对照品储备溶液；