[发明专利]一种喜树碱衍生物及其手性异构体的分析方法及其应用

说明书

本发明提供了一种喜树碱衍生物及其手性异构体的分析方法及其应用，所述分析可采用反相色谱硅胶基质填料色谱柱并使用反相色谱法进行分析；且，该分析方法分析的同时，可以参照喜树碱衍生物对照品保留时间，接收相应主峰，收集馏分浓缩，干燥，完成对喜树碱衍生物及其手性异构体的制备。该分析方法中所述反相色谱硅胶基质填料为硅胶基质键合C18、硅胶基质键合C8或硅胶基质键合氰基；所述反相色谱法的流动相为水相‑有机相混合溶剂。本发明应用反相色谱硅胶基质常规固定相的液相色谱方法对喜树碱衍生物两种手性异构体进行分析分离，进而实现对其进行质量控制及单一手性异构体的制备。

技术领域

本发明属于化学分析技术领域，具体涉及一种喜树碱衍生物及其手性异构体的分析方法及其应用。

背景技术

喜树碱衍生物(化合物A)是一种DNA拓扑酶抑制剂，常被用于肿瘤治疗之中。Enhertμ是2020年上市的一种治疗HER2阳性乳腺癌的ADC药物，其中的有效载药(payload)就是化合物A。目前仍然有许多含有该类化合物的药物处于研究和开发中。因此，如何分析及制备喜树碱衍生物及其手性异构体，进而控制喜树碱衍生物的质量，显得尤为重要。喜树碱衍生物及其手性异构体结构如下所示：

其中A为喜树碱衍生物；(B)为化合物A的手性异构体；

近年来，随着硅胶色谱填料的多样化，以反相色谱硅胶基质固定相的液相色谱法应用日益广泛，然而，利用以反相色谱硅胶基质固定相分析及制备喜树碱衍生物及其手性异构体的方法未见相关报道。因此，如何建立一种能够简单、快速、高效的分析及分离喜树碱衍生物及其手性异构体的方法，进而实现对其质量的控制，是目前需要解决的技术问题。

发明内容

为了解决现有技术的不足，本发明提供了一种喜树碱衍生物及其手性构体的分析方法及其应用。

本发明通过以下技术手段实现：

一种喜树碱衍生物及其手性异构体的分析方法，采用反相色谱硅胶基质填料色谱柱并使用反相色谱法进行分析；所述反相色谱硅胶基质填料为硅胶基质键合C18、硅胶基质键合C8或硅胶基质键合氰基；所述反相色谱法的流动相为水相-有机相混合溶剂。

优选地，所述分析方法包括以下步骤：

S1、喜树碱衍生物及其手性异构体对照品均分别用水：乙腈：三氟乙酸＝70～90：10～20：0.05～0.2，配置成浓度为0.1mg/mL的对照品溶液；

S2、喜树碱衍生物及其手性异构体按质量百分比1:1混合后的供试品用水：乙腈：三氟乙酸＝70～90：10～20：0.05～0.2，配制成浓度为0.1～2mg/mL的供试品溶液，进样量为5～10uL；

S3、设置反相色谱法的条件为，流动相比例为80：20～60：40，流速为0.5～1.5mL/min；液相色谱柱温箱温度为20～40℃；检测波长为220nm；

S4、精密吸取对照品及供试品溶液分别注入液相色谱柱，参照两份喜树碱衍生物的对照品保留时间，从而完成对喜树碱衍生物及其手性异构体的分析。

所述分析方法对流动相、进样量及波长等都做了较佳的选择，从而确保了喜树碱衍生物的稳定性，提高了色谱峰的对称性，从而实现较好的分离效果。

优选地，所述S1及S2中水：乙腈：三氟乙酸＝85：15：0.1。

优选地，所述S3中水相流动相为含有三氟乙酸的水溶液，所述有机相流动相为含有三氟乙酸的乙腈溶液或含有三氟乙酸的甲醇溶液。

优选地，所述S3中有机相流动相是含有体积分数为0.05～0.5％三氟乙酸的乙腈溶液或含有体积分数为0.05～0.5％三氟乙酸的甲醇溶液。