[发明专利]一种黄瓜果实刺瘤石蜡切片制作方法

权利要求书

1.一种黄瓜果实刺瘤石蜡切片制作方法，其特征在于，所述切片制作方法包括如下步骤：

(1)选取合适发育时期的黄瓜果实刺瘤材料立即放入装有FAA固定液的容器瓶中，轻晃动容器瓶至少一次，待黄瓜果实刺瘤材料沉于液面后固定30min；

(2)然后将容器瓶中的FAA固定液全部倒掉，再次加入新的FAA固定液到容器瓶中，然后用封口膜封住瓶口，固定至少48h；

(3)然后将容器瓶中的FAA固定液再次全部倒掉，加入浓度50％乙醇到容器瓶中诱导1h；

(4)最后依次进行整染、脱水、透明、浸蜡与包埋、切片及粘片及展片、脱蜡与染色、封片。

2.根据权利要求1所述的一种黄瓜果实刺瘤石蜡切片制作方法，其特征在于，所述FAA固定液由质量浓度38％甲醛水溶液、冰醋酸和浓度100％乙醇以体积比为2：1：10混合配制而成。

3.根据权利要求1所述的一种黄瓜果实刺瘤石蜡切片制作方法，其特征在于，所述步骤(2)中的储藏条件为：常温储藏或置于4度冰箱中储藏。

4.根据权利要求1所述的一种黄瓜果实刺瘤石蜡切片制作方法，其特征在于，所述步骤(3)中的整染步骤为：将黄瓜果实刺瘤材料整体放入含有埃氏苏木精稀释液的容器瓶中染色3-5天，每天轻轻晃动容器瓶1-2次，所述埃氏苏木精稀释液的体积为黄瓜果实刺瘤材料的10-15倍。

5.根据权利要求4所述的一种黄瓜果实刺瘤石蜡切片制作方法，其特征在于，所述步骤(3)中的脱水步骤为：整染后将黄瓜果实刺瘤材料从含有埃氏苏木精稀释液的容器瓶中取出，放入含有50％乙醇溶液的容器瓶中室温诱导30min，然后再重复一次，然后再将容器瓶中的乙醇浓度改为60％，再进行室温诱导30min，然后再将容器瓶中的乙醇浓度改为70％，再进行室温诱导30min，再将容器瓶中的乙醇浓度改为80％，再进行室温诱导30min，再将容器瓶中的乙醇浓度改为90％，再进行室温诱导30min，再将容器瓶中的乙醇浓度改为95％，再进行室温诱导30min，再将容器瓶中的乙醇浓度改为100％，再进行室温诱导30min，然后将容器瓶中的无水乙醇倒出，再导入新的无水乙醇置容器瓶中，然后再室温诱导30min，并重复1次。

6.根据权利要求5所述的一种黄瓜果实刺瘤石蜡切片制作方法，其特征在于，所述步骤(3)中的透明步骤为：脱水完成后，将容器瓶中的无水乙醇倒出，将容器瓶中的溶液改为1/3二甲苯+2/3无水乙醇，再室温诱导30min，然后再将容器瓶中的溶液改为1/2二甲苯+1/2无水乙醇，再室温诱导30min，然后再将容器瓶中的溶液改为2/3二甲苯+1/3无水乙醇，再室温诱导30min，然后再将容器瓶中的溶液改为纯二甲苯，再室温诱导30min，并重复2次，最后倒掉容器瓶中的一半二甲苯，然后加入一半蜡屑，进行室温过夜。

7.根据权利要求6所述的一种黄瓜果实刺瘤石蜡切片制作方法，其特征在于，所述步骤(3)中的浸蜡与包埋的步骤为：透明后，将容器瓶放于42℃恒温箱中保温60min，然后逐步加入蜡屑于容器瓶中，直至容器瓶内部填满，每次添加蜡屑后，都需保温60min，然后将容器瓶中的混合液倒出，加入熔融石蜡到容器瓶中，然后放置到60℃室温中诱导4h以上，并重复6次，然后将包埋盒放在温台上，并将浸蜡后的黄瓜果实刺瘤材料和石蜡一起倒入包埋盒中，然后用预热解剖针轻轻拨黄瓜果实刺瘤材料，将黄瓜果实刺瘤材料的果刺朝上和黄瓜果实刺瘤材料整体垂直于包埋盒底部位置，然后将包埋盒放入水槽中迅速冷却，冷却后于4℃冰箱中保存备用。