[发明专利]一种抗根肿病耐抽薹大白菜的聚合育种方法

权利要求书

1.一种抗根肿病耐抽薹大白菜的聚合育种方法，包括以下步骤：

1)以Y1031-1(Crr3)为母本，以Y903-1(CRb)为父本进行杂交获得基因型为R_Crr3-R_CRb-的F1真杂种；将所述基因型为R_Crr3-R_CRb-的F1真杂种自交，利用分子标记筛选获得基因型为R_Crr3R_Crr3R_CRbR_CRb的F2种子；

2)以步骤1)中获得的基因型为R_Crr3R_Crr3R_CRbR_CRb的F2种子为母本，以携带纯合抗根肿病基因Crr1a和耐抽薹纯合位点BrFLC1_GG的14CR514-16为父本，杂交获得基因型为R_Crr1a-R_Crr3-R_CRb-FLC1_G-的杂合F1代种子；

3)采用游离小孢子培养方法对所述基因型为R_Crr1a-R_Crr3-R_CRb-FLC1_G-的杂合F1代种子进行培养，利用分子标记筛选纯合单株获得基因型为R_Crr1aR_Crr1aR_Crr3R_Crr3R_CRbR_CRbFLC1_GFLC1_G的纯合抗根肿病耐抽薹大白菜。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)中所述分子筛选标记包括R_Crr3基因的分子标记；扩增所述R_Crr3基因的分子标记的引物对的核苷酸序列如SEQ ID No.1和SEQID No.2所示。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，步骤1)中所述分子筛选标记包括R_CRb基因的分子标记；扩增所述R_CRb基因的分子标记的引物对的核苷酸序列如SEQ ID No.3和SEQID No.4所示。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤2)中所述分子筛选标记包括R_Crr1a基因的分子标记；扩增所述R_Crrla基因的分子标记的引物对的核苷酸序列如SEQ ID No.5和SEQID No.6所示。

5.根据权利要求1或4所述的方法，其特征在于，步骤2)中所述分子筛选标记包括BrFLC1_GG基因的SNP-KASP检测；进行所述BrFLC1_GG基因的SNP-KASP检测的引物包括核苷酸序列如SEQ ID No.7、SEQ ID No.8和SEQ ID No.9所示。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤1)和步骤2)中的杂交为人工授粉杂交。

7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤4)中所述游离小孢子培养方法包括以下步骤：

S1)将所述基因型为R_Crr1aR_Crr1aR_Crr3R_Crr3R_CRbR_CRbFLC1_GFLC1_G的杂合F1代种子进行低温春化处理后进行播种，培养获得大白菜植株；

S2)从所述大白菜植株的花蕾中分离获得小孢子；

S3)将所述小孢子在32～35℃暗培养2～3d后，25℃继续暗培养8～12d获得胚状体；

S4)将所述胚状体光照培养、分化、生根获得大白菜植株。