[发明专利]一种检测鼠伤寒沙门氏菌的试剂盒及其制备方法

权利要求书

1.一种检测鼠伤寒沙门氏菌的试剂盒的制备方法，其特征在于，包括：

步骤一：Fe₃O₄纳米粒子的制备

将FeCl₃·6H₂O、柠檬酸钠和CH₃COONa·3H₂O在乙二醇中室温磁搅拌至完全溶解，然后将所得均质溶液转移至反应釜内,将反应釜放置于烘箱中反应，用永磁铁从反应溶液中分离黑褐色的固体物质，清洗后得到具有超顺磁性的Fe₃O₄纳米粒子；

步骤二：Fe₃O₄@Ag磁性纳米粒子的制备

将AgNO₃和聚乙烯吡咯烷酮k-30溶于聚乙二醇中，充分溶解后，加入步骤一制备的Fe₃O₄纳米粒子分散其中进行反应，用永磁铁从反应溶液中分离褐色的固体物质，清洗后得到Fe₃O₄@Ag磁性纳米粒子；

步骤三：沙门氏菌的apt-Fe₃O₄@Ag NPs纳米探针的制备

将三(2-羰基乙基)磷盐酸盐溶液加入到鼠伤寒沙门氏菌适配体水溶液，室温条件下混旋，得到活化后的适配体溶液，将步骤二得到的Fe₃O₄@Ag纳米粒子加入上述活化后的适配体溶液，室温条件下混旋过夜，得到沙门氏菌的apt-Fe₃O₄@Ag NPs纳米探针；

步骤四：尿素/苯酚红试纸的制备

将苯酚红和尿素溶于乙醇溶液中，将滤纸浸泡在上述溶液中，浸泡过后的试纸进行干燥，得到尿素/苯酚红试纸；

步骤五：刻蚀剂的制备

取H₂O₂加至PBS缓冲液中，混合均匀，得到H₂O₂刻蚀剂，避光保存备用；

步骤六：脲酶溶液的制备

称取脲酶溶于PBS缓冲液中，得到脲酶溶液，保存备用。

2.根据权利要求1所述的一种检测鼠伤寒沙门氏菌的试剂盒的制备方法，其特征在于，所述的步骤一中FeCl₃·6H₂O、柠檬酸钠和CH₃COONa·3H₂O质量比为2.16：0.5：3.34。

3.根据权利要求1所述的一种检测鼠伤寒沙门氏菌的试剂盒的制备方法，其特征在于，所述步骤一的反应温度为200℃，反应时间为10h。

4.根据权利要求1所述的一种检测鼠伤寒沙门氏菌的试剂盒的制备方法，其特征在于，所述步骤二的AgNO₃、聚乙烯吡咯烷酮k-30、Fe₃O₄纳米粒子的质量比为0.1：2.5：0.2。

5.根据权利要求1所述的一种检测鼠伤寒沙门氏菌的试剂盒的制备方法，其特征在于，所述的步骤二的反应温度为100℃，反应时间为12h。

6.根据权利要求1所述的一种检测鼠伤寒沙门氏菌的试剂盒的制备方法，其特征在于，所述步骤三中三(2-羰基乙基)磷盐酸盐溶液的浓度为1mM，鼠伤寒沙门氏菌适配体水溶液的浓度为10μM。

7.根据权利要求1所述的一种检测鼠伤寒沙门氏菌的试剂盒的制备方法，其特征在于，所述步骤三中三(2-羰基乙基)磷盐酸盐溶液和鼠伤寒沙门氏菌适配体水溶液的体积比为1：10。

8.根据权利要求1所述的一种检测鼠伤寒沙门氏菌的试剂盒的制备方法，其特征在于，所述步骤三的鼠伤寒沙门氏菌适配体水溶液的体积μL：Fe₃O₄@Ag纳米粒子的质量mg为10：1。

9.根据权利要求1所述的一种检测鼠伤寒沙门氏菌的试剂盒的制备方法，其特征在于，所述步骤四中苯酚红和尿素的质量比为0.1：3。