[发明专利]一种稳定、抗干扰能力强的血清唾液酸测定试剂盒及其制备方法和应用

说明书

本发明提供一种唾液酸测定试剂盒，试剂盒含有试剂R1和试剂R2；试剂R1中含有以下成分：三羟甲基氨基甲烷‑盐酸（Tris‑HCL）缓冲液、乳酸脱氢酶（LDH）、N‑乙酰神经醛缩酶、还原型辅酶Ⅰ（NADH）、表面活性剂、稳定剂、EDTA‑Na₂、防腐剂；试剂R2：三羟甲基氨基甲烷‑盐酸（Tris‑HCL）缓冲液、神经氨酸苷酶、表面活性剂、稳定剂、防腐剂。本发明同时提供了该试剂盒的制备方法和应用，该试剂盒是一种稳定性强，抗干扰能力强，准确度高，重复性好的液体试剂盒。

技术领域

本发明涉及生化试剂测定技术领域，特别涉及一种唾液酸测定试剂盒，还涉及所述唾液酸测定试剂盒制备方法和应用。

背景技术

唾液酸(Sialic acid SA)又称N-乙酰神经氨酸，唾液酸是含有9碳糖神经氨酸的一族复合物的总称，在人体组织中其主要的衍生物是N-乙酰神经氨酸，它位于糖蛋白、糖脂结构的末端，而糖蛋白、糖脂则是细胞膜的重要组成成分，因此唾液酸对于维护细胞表面的功能起着决定性的作用。如参与识别宿主与病体之间的反应，保护膜免受蛋白水解，有助于激素受体的激活等。近年来，许多学者定量测定了不同疾病状态的血清唾液酸含量，发现肾病，糖尿病，心肌梗塞，中枢神经系统病变以及细菌感染时，其含量显著异常，同时，唾液酸也常被视为肿瘤标志之一。

肾功能的实验室检测，多年来临床上都广泛采用了BUN，Cr，尿酸及内生肌酐清除率等作为试验指标，但是这些指标在肾脏疾病，尤其是在慢性肾炎的早期诊断，其敏感性较差。研究发现，早期慢性肾小球肾炎和慢性肾功能不全的病人血清唾液酸显著升高，且与BUN，Cr无明显相关性，同时病人的尿中唾液酸也增高。由此唾液酸浓度的测定可以作为肾功能损害早期诊断的指标。同时，血清唾液酸在心肌梗塞病人中，与CRP、α1-抗胰蛋白酶、α1-酸性糖蛋白、α2-巨球蛋白等指标均呈正相关，为显著升高。另外，唾液酸含量与恶性肿瘤细胞的增值，转移、浸润、细胞粘附性降低，肿瘤抗原性及逃避宿主细胞的免疫监视等密切相关，是一种广泛有效的肿瘤标志物。测定血清唾液酸的含量，对恶性肿瘤的辅助诊断，疗效观察及预后判断有重要的临床价值。

由于唾液酸的多种生理作用，所以唾液酸的诊断具有非常重要的临床意义。

目前检测唾液酸的方法有硫代巴比妥酸显色法、过碘酸—间苯二酚法、酶联免疫法、神经氨酸苷酶法，荧光分析法、高效液相层析法。硫代巴比妥酸显色法、过碘酸—间苯二酚法均为最初的化学检测方法，但该两种法抗干扰能力差，操作繁琐。酶联免疫法灵敏度高，特异性强，但干扰因素多，重复性不好，价格不菲；荧光分析法和高效液相法，准确性和灵敏度高，但是仪器设备昂贵，试剂保存不方便，且为手工操作，耗时较长，价格不菲，无法在临床中应用；神经氨酸苷酶法具有特异性高，操作简单快捷、准确安全、可自动化分析、成本较低的优点，但现有技术中国产试剂盒存在稳定性、重复性较差等缺点，本发明针对现有唾液酸试剂盒的缺点进行改进以满足临床检测以及化学分析的要求。

发明内容

为了解决上述问题，本发明提供一种唾液酸测定试剂盒及其制备方法和应用，该试剂盒是一种稳定性强，抗干扰能力强，准确度高，重复性好的液体试剂盒。

本发明是通过以下技术方案实现的：

一种唾液酸测定试剂盒，试剂盒含有试剂R1和试剂R2；

试剂R1中含有以下成分：

试剂R2：

其中所述百分比为体积比。

优选地，所述试剂R1的pH为7.5-9.5。

优选地，所述试剂R2的pH为7.0-8.0。

优选地，所述试剂R1和R2试剂中的表面活性剂选自吐温系列、曲拉通系列中的一种或两种。