[发明专利]一种能够溶酶体逃逸的肽纳米颗粒及其制备方法和应用

说明书

本发明提供了一种能够溶酶体逃逸的肽纳米颗粒及其制备方法和应用，属于靶向药物技术领域，所述能够溶酶体逃逸的肽纳米颗粒，在自组装的色氨酸‑苯丙氨酸二肽纳米颗粒的表面连接AS1411适体、流感血凝素肽HA和抗肿瘤药物。本发明所述肽纳米颗粒，能够有效地靶向治疗肿瘤，具有良好的低毒性和生物相容性；可以在肿瘤可视化的基础上改善药物在肿瘤部位的蓄积，并最终通过多种药物的协同作用抑制肿瘤的生长。本发明提供的肽纳米颗粒能够同时用于治疗和生物成像。

技术领域

本发明属于靶向药物技术领域，尤其涉及一种能够溶酶体逃逸的肽纳米颗粒及其制备方法和应用。

背景技术

靶向药物的载体通常通过内吞作用进入细胞形成内体(endosome)，随后经过多种机制作用最终发展为溶酶体。由于一般的靶向药物不具备溶膜肽，后主要的障碍是受到内质溶酶体包裹的限制。溶酶体中含有大量的降解酶，这会导致许多纳米药物尤其是生物相容性良好的药物，例如，核酸倾向于被酶促降解，从而导致细胞溶质减少甚至没有释放。因此，迫切需要一种稳健的策略来改善核酸递送以从内质溶酶体逃逸并进行释放以实现有效的核酸递送。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种能够溶酶体逃逸的多功能肽纳米颗粒及其制备方法和应用。

本发明提供了一种能够溶酶体逃逸的肽纳米颗粒，以自组装的色氨酸-苯丙氨酸二肽纳米颗粒为核心，所述核心的表面连接AS1411适体、流感血凝素肽HA和抗肿瘤药物。

优选的，所述抗肿瘤药物包括氯法拉滨、SiRNA和DOX。

优选的，所述SiRNA包括SEQ ID No.1～SEQ ID No.4中的一种或几种。

优选的，所述AS1411适体的核苷酸序列如SEQ ID No.5所示，所述流感血凝素肽HA的氨基酸序列如SEQ ID No.6。

优选的，所述色氨酸-苯丙氨酸二肽纳米颗粒通过表面羧基与所述AS1411适体、流感血凝素肽HA或氯法拉滨偶联；所述DOX通过π-π堆叠相互作用与所述色氨酸-苯丙氨酸二肽纳米颗粒连接。

本发明提供了所述的肽纳米颗粒的制备方法，包括以下步骤：

1)将色氨酸-苯丙氨酸二肽DNPs进行自组装形成自组装DNPs；

2)将所述自组装DNPs表面的羧基活化获得羧基活化的自组装DNPs；

3)将羧基活化的自组装DNPs与AS1411适体、流感血凝素肽HA和氯法拉滨混合反应获得DNPs/Clolar/AS1411/HA；

4)将SiRNA与DNPs/Clolar/AS1411/HA混合反应获得DNPs/Clolar/AS1411/HA/SiRNA；

5)将所述DNPs/Clolar/AS1411/HA/SiRNA与DOX混合获得DNPs/Clolar/AS1411/HA/SiRNA/DOX。

优选的，步骤1)中所述自组装的温度为72～78℃，所述自组装的时间为25～35min。

优选的，步骤4)中所述混合反应的温度为24～26℃，所述混合反应的时间为1.5～2.5h。

本发明提供了所述的能够溶酶体逃逸的肽纳米颗粒在制备靶向治疗肿瘤的药物和载体中的应用。

本发明提供了所述的能够溶酶体逃逸的肽纳米颗粒在制备肿瘤成像试剂中的应用。

本发明的有益效果：本发明提供的肽纳米颗粒，可以有效地靶向治疗肿瘤。本发明提供的由二肽自组装形成的无毒DNPs具有良好的低毒性和生物相容性；本发明所述的肽纳米颗粒通过多种药物协同治疗来提高肿瘤的治疗效果；在本发明中，所述AS1411适体可以增强药物递送能力的特异性，HA可以改善内体逃逸。