[发明专利]一种小鼠心肌梗死模型的制作方法

权利要求书

1.小鼠心肌梗死模型的快速制作方法按下列步骤进行，调整麻醉剂异氟烷浓度为异氟烷与氧气的混合气体的2.5-3.5%并输入至诱导麻醉箱，将小鼠放入诱导麻醉箱中，1-2分钟小鼠麻醉，调整麻醉剂异氟烷浓度为异氟烷与氧气混合气体的1-2%并输入至小鼠呼吸面罩，将小鼠移至小动物手术台，呼吸面罩罩住小鼠口鼻，对小鼠进行持续麻醉，用胶带固定小鼠四肢，把小鼠胸部备皮消毒，眼科剪剪开左前胸皮肤1厘米，用镊子和止血钳钝性分离胸大肌和胸小肌，肉眼可见肋骨，止血钳从第三、四肋间穿入胸腔扩开直径0.5-1厘米开口，在小鼠体外术者左手拇指抵住小鼠腹腔左上部，中指弯曲抵住小鼠腹腔右侧上部，食指抵住小鼠胸腔右侧循环挤压小鼠胸腔，待小鼠心尖部位于胸腔开口处时再同时挤压小鼠胸腔，配合止血钳开口大小、方向调整，随着小鼠心脏的自主收缩博动，小鼠心脏游离端即可通过第三、四肋间开口跳出胸腔，使用7-0号手术缝合针线平左心耳下缘进针，深度0.5毫米，向心脏右侧至肺动脉圆椎与心尖部连线处出针结扎前降支，见心脏左心室前壁心肌颜色变淡，止血钳从心脏下面探入3-4肋间撑开胸腔开口，随着心脏自主收缩，心脏收回到胸腔，术者左手拇指、食指和中指配合同时挤压胸腔，挤出胸腔中空气，止血钳钳夹第三、四肋骨闭合胸腔开口，将胸小肌复位于第三、四肋间上，胸大肌覆盖于胸小肌之上，胸部皮肤切口两侧钳夹合拢，用6-0号手术缝合针线缝合皮肤切口；术后切口碘伏消毒，撤除呼吸面罩，将小鼠置于37℃动物复温电热毯上，1-2分钟后小鼠苏醒；术后给小鼠做心电图和超声检查，检查小鼠心功能，术后2周处死小鼠，取出心脏检测小鼠心肌组织梗死情况。

2.根据权利要求1所述的小鼠诱导麻醉所使用的异氟烷浓度是异氟烷与氧气混合气体的2.5-3.5%。

3.根据权利要求1所述的小鼠持续麻醉所使用的异氟烷浓度是异氟烷与氧气混合气体的1-2%。

4.根据权利要求1所述分离胸大肌和胸小肌的方法为钝性分离。

5.在根据权利要求1所述止血钳从第三、四肋间穿入胸腔扩开开口直径为0.5-1厘米。

6.根据权利要求1所述在促使小鼠心脏跳出胸腔时术者挤压胸腔的操作方式是：左手拇指抵住小鼠腹腔左上部，中指弯曲抵住小鼠腹腔右侧上部，食指抵住小鼠胸腔右侧循环挤压小鼠胸腔，待小鼠心尖部位于胸腔开口处时再同时挤压小鼠胸腔，并配合调整止血钳扩开胸腔开口大小和方向。

7.根据权利要求1所述在结扎小鼠心脏左心室前降支时使用7-0号手术缝合针线平左心耳下缘进针，深度0.5毫米，向心脏右侧至肺动脉圆椎与心尖连线处出针结扎左心室前降支。

8.根据权利要求1所述在关闭胸腔时为保证胸腔负压，术者的操作手法是左手拇指、食指和中指配合同时挤压胸腔，挤出胸腔中空气，用止血钳钳夹第三、四肋骨闭合胸腔开口，将胸小肌复位于第三、四肋间上，胸大肌覆盖于胸小肌之上，胸部皮肤切口两侧钳夹合拢，缝合皮肤切口。

9.根据权利要求1所述术后撤除小鼠呼吸面罩，将小鼠置于37℃动物复温电热毯上。

10.根据权利要求1所述制作的小鼠心肌梗死模型符合以下技术特征，术后给小鼠做心电图检查，出现ST段抬高心肌梗死心电图表现，术后2周超声心动图检查小鼠心功能，小鼠左室射分数（LVEF）、左室短轴缩短率（LVFS）比术前减低，左室收缩末内径（LVESD）和舒张末内径（LVEDD）比术前增加，小鼠心脏左心室前壁心肌厚度（LVAW）比术前减低，所有以上数据经统计学处理P0.05为符合心肌梗死特征，术后2周处死小鼠，取出心脏可见小鼠左心室前壁大面积心肌梗死，室壁厚度比正常对照组减低，HE染色可见瘢痕组织形成。