[发明专利]一种胶原材料及其制备方法和用途

权利要求书

1.一种胶原材料的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤1、繁育基因编辑动物；

步骤2、采集步骤1动物的胶原原材料作为原料；

步骤3、取步骤2制得的所述原料脱细胞；所述脱细胞的次数至少为2次；

步骤4、取步骤3制得的材料分解；所述分解的次数至少为2次；

步骤5、取步骤4分解得到的材料通过超滤提纯胶原材料；

步骤6、取步骤5得到的材料冻干提纯；

其中，步骤3中所述脱细胞的方法包括物理方法、化学方法和/或生物方法；所述物理方法包括反复冻融、超声处理；所述化学方法包括十二烷基硫酸钠(SDS)处理；所述生物方法包括中性蛋白酶酶解；

所述物理方法、化学方法或生物方法的处理次数分别为0～10次，且所述脱细胞的方法中至少有两种的处理次数不同时为0；

所述反复冻融的冷冻温度为-20～-196℃(液氮)，冷冻时间为5min～24h，解冻温度为4～40℃，解冻时间为0.5～6h；

所述超声处理的低频频率为10～40KHz，低频处理时间为5min～24h；高频频率为60～120KHz，高频处理时间为5min～24h；超声功率为100W～10KW，超声温度为0～40℃；

所述中性蛋白酶的浓度范围为0.001～5wt.％，酶活为500～130000U/g，工作浓度范围为0.6～2.4U/ml，处理温度为0～40℃，振荡频率为50～3000rpm，处理时间为0.5～24h；

所述SDS的浓度范围为0.001～5wt.％，振荡频率为100～3000rpm，处理温度为0～40℃，处理时间为0.5～24h；

其中，步骤4中所述分解包括胃蛋白酶酶解、乙酸溶解或超声处理中的至少一种；

所述超声处理的低频频率范围为10～40KHz，低频处理时间为1～24h，高频频率范围为60～120KHz，高频处理时间为1～24h，超声功率为1～10KW，超声温度为0～40℃；所述胃蛋白酶酶解中，胃蛋白酶的酶活为800～100000U/g；浓度范围为0.001～10wt.％，振荡频率为100～3000rpm，处理温度为0～40℃，处理时间为0.5～48h；所述乙酸溶解中乙酸浓度为0.001～20wt.％；

所述胃蛋白酶酶解、乙酸溶解或超声处理的处理次数分别为0～10次，且所述分解中至少有两种的处理次数不同时为0。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤3具体为：

浸没于0.08wt.％中性蛋白酶溶液中，酶活为1000U/g，温度为25℃，振荡频率为100rpm，处理时间为8h；

超声波清洗，110KHz处理30min，功率1KW，温度为10℃；

浸没于0.1wt.％SDS溶液中12h，振荡频率为1000rpm，温度为30℃；

超声波清洗，20KHz处理200min，功率5KW，温度为30℃；

或

浸没于1wt.％SDS溶液中6h，振荡频率为500rpm，温度为20℃；

浸没于0.2wt.％中性蛋白酶溶液中，酶活为800U/g，温度为10℃，振荡频率为3000rpm，处理时间为12h；

浸没于0.05wt.％SDS溶液中3h，振荡频率为400rpm，温度为20℃；

超声波清洗，100KHz处理3h，功率1KW，温度为25℃；

或

浸没于0.4wt.％中性蛋白酶溶液中，酶活为2000U/g，温度为10℃，振荡频率为400rpm，处理时间为12h；

浸没于超声波清洗器中，40KHz处理4h，功率10KW，温度为30℃；

浸没于11wt.％SDS溶液中8h，振荡频率为600rpm，温度为20℃；

超声波清洗，60KHz处理30min，功率1KW，温度为30℃。