[发明专利]一种脱细胞真皮材料及其制备方法和用途

说明书

本发明涉及生物材料领域，具体涉及一种取自基因编辑动物的真皮材料，进一步进行优化的脱细胞处理技术和交联技术处理，由此制备的真皮材料及其用途。本发明的脱细胞真皮材料免疫原性低，且生物活性好，用于临床烧伤、整形、口腔颌面修补、腹壁修补等领域。

技术领域

本发明涉及生物材料领域，特别涉及一种脱细胞真皮材料及其制备方法和用途。

背景技术

脱细胞真皮材料因其具有良好的组织相容性，炎症反应轻微，能快速血管化、促进引导组织再生等优点，目前广泛应用于烧伤、整形、口腔颌面修补、腹壁修补等领域。然而，当材料中残留的异种抗原进入人体内时，通常会引发免疫排斥反应，如超急性免疫排斥反应，这种免疫排斥反应的主要靶抗原被认为是由存在于动物组织中的α-Gal抗原引起的，α-Gal抗原存在于除人和高等灵长动物以外的大部分哺乳动物体内。目前虽然可以在脱细胞过程中加入α-1,3Gal酶，降解组织中的α-1,3Gal抗原，从而减轻受体血清对脱细胞真皮材料的免疫反应，但无法完全避免。

针对以上临床问题，我们通过基因编辑技术彻底敲除异种真皮材料中的某些特定抗原(如α-Gal抗原)，从材料来源上解决脱细胞真皮材料存在的免疫原性问题(尤其是超急性免疫排斥反应)，进一步优化脱细胞和交联化处理，降低其免疫原性，提高其生物活性。

发明内容

本发明提供一种脱细胞真皮材料及其制备方法和用途。本发明的脱细胞真皮材料取自基因编辑动物的真皮材料，进一步进行优化的脱细胞处理技术和交联技术处理，由此制备的真皮材料及其用途。本发明的脱细胞真皮材料免疫原性低，且生物活性好，用于临床烧伤、整形、口腔颌面修补、腹壁修补等领域。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供一种脱细胞真皮材料的制备方法，包括如下步骤：

步骤1、繁育基因编辑动物；

步骤2、采集步骤1所述动物的真皮作为原料；

步骤3、取步骤2制得的所述原料脱细胞；

步骤4、取步骤3制得的材料交联化；

其中，步骤3具体为：

浸没于0.001～1wt.％SDS溶液中6～24h，振荡频率为500～1000rpm，温度为0～40℃；

置于-40～-80℃中1～6h，置于20～40℃中1～3h，置于-20～-40℃中3～6h，置于0～30℃中1～2h；

超声波清洗，40～100KHz处理30min～6h，功率200W～1KW，温度为0～40℃；

浸没于0.01～5wt.％SDS溶液中0.5～12h，振荡频率为300～600rpm，温度为20～40℃；

超声波清洗，40～80KHz处理3～6h，功率200W～800W，温度为10～40℃；

置于-20～-60℃中30min～3h，置于20～40℃中1～2h，置于-40～-80℃中30min～3h，置于20～40℃中1～2h。

在本发明的一些具体实施方案中，所述交联化采用的交联剂包括化学交联剂和/或生物交联剂中的至少一种；

所述化学交联剂包括醛类、亚氨酸酯类、N-羟基琥珀酰亚胺酯类(NHS酯)、马来酰亚胺类、卤乙酰基类、二硫代联吡啶、酰肼类、碳二亚酰胺类中的一种或两者以上的混合物；

所述醛类包括戊二醛、甲醛、乙醛中的一种或两者的混合物；

所述生物交联剂包括原花青素、京尼平中的一种或两者的混合物；