[发明专利]一种心包膜材料及其制备方法和用途

权利要求书

1.一种心包膜材料的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤1、繁育基因编辑动物；

步骤2、采集步骤1所述动物的心包膜作为原料；

步骤3、取步骤2制得的所述原料脱细胞；

步骤4、取步骤3制得的材料交联化；

其中，步骤3具体为：

超声波清洗，20～100KHz处理30min～6h，功率500W～5KW，温度为0～40℃；

浸没于0.001～5wt.％SDS溶液中1～24h，振荡频率为100～1000rpm，温度为0～40℃；

超声波清洗，40～80KHz处理3～6h，功率1～5KW，温度为20～40℃；

浸没于0.001～1wt.％SDS溶液中3～6h，振荡频率为100～500rpm，温度为20～40℃；

超声波清洗，60～100KHz处理3～6h，功率1～5KW，温度为20～40℃；

步骤4具体为：

浸没于0.00001～5wt.％京尼平溶液中0.5～12h，浸没温度为0～40℃，重复浸没1～10次；

浸没于0.001～1wt.％戊二醛溶液中0.5～24h，浸没温度为25～40℃，重复浸没1～5次；

浸没于0.005～5wt.％原花青素溶液中0.5～12h，浸没温度为25～40℃，

重复浸没1～5次。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述基因编辑包括巨型核酸酶(Meganuclease)、锌指核酸酶(ZFNs)、转录激活样效应因子核酸酶(TALEN)或成簇规律间隔短回文重复(CRISPR/Cas)系统中的至少一种。

3.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述基因编辑包括基因敲除和/或基因转入；

所述基因敲除中敲除的基因包括GGTA1、CMAH、β4GalNT2或PERV中的至少一种；

基因转入中转入的基因包括hCD46、hCD55、hCD47、LEA29Y、hTBM、hTFPI或EPCR中的至少一种。

4.如权利要求1至3任一项所述的方法，其特征在于，所述动物包括猪、牛、羊、马、猴、狗、兔、鸡、鼠、蚕、鱼、海洋生物、驴中的至少一种；所述动物为基因编辑后稳定传代3代以上的动物；优选的，选用基因编辑后稳定传代6代的动物制备心包膜材料。

5.如权利要求1至4任一项所述的方法制得的动物源性心包膜材料。

6.如权利要求5所述的动物源性心包膜材料在制备组织工程材料、再生医学材料、转化医学材料中的应用。

7.组合物，其特征在于，包括如权利要求6所述的动物源性心包膜材料以及医学上可接受的辅料。