[发明专利]CD47抗体或其免疫活性片段及应用

说明书

本发明提供了新型CD47抗体或其免疫活性片段、或包含所述抗体/免疫活性片段的组合物。该CD47抗体不会引起红细胞凝集，且与红细胞、血小板表现出极弱水平的低结合或不结合。本发明提供了编码所述CD47抗体或其免疫活性片段的核酸、表达载体、宿主细胞。此外，本发明提供了该CD47抗体或含有该CD47抗体/免疫活性片段的药物组合物用于制备治疗CD47介导的疾病的药物的用途。

技术领域

本发明涉及生物医学领域，具体涉及包括抗体技术领域及免疫领域，更具体的涉及CD47抗体或其免疫活性片段及应用。

背景技术

CD47也被称为整合素相关蛋白(Integrin Associated Protein，IAP)，广泛的表达于细胞的表面，可与信号调节蛋白α(Signalregμlatoryproteinα，SIRPα)、血小板反应蛋白(thrombospondin-1，TSP1)以及整合素(integrins)相互作用，介导细胞凋亡、增殖、免疫等一系列的反应。CD47在20世纪80年代首次被确认为人类卵巢癌的肿瘤抗原，继而CD47被发现在多种类型的人类肿瘤中表达，包括急性髓细胞白血病(AML)、慢性髓细胞白血病(CML)、急性淋巴细胞白血病(ALL)、非霍金性淋巴瘤(NHL)、多发性骨髓瘤(MM)、膀胱癌(BC)和其他实体肿瘤。它的表达和活性已经与许多疾病和失调相关联。它是一种广泛表达的跨膜糖蛋白，并带有一个免疫球蛋白样结构域和五个跨膜区，其作为SIRPα的细胞配体，通过信号调节蛋白α(SIRPα)的NH2末端的V样结构域与SIRPα结合。SIRPα主要表达于骨髓细胞，包括巨噬细胞，粒细胞，树突状细胞(DC)，肥大细胞，和它们的前体细胞，包括造血干细胞。

CD47是一个“自我”标记，代表“别吃我”信号。人体需要20-30万亿的红细胞，以此保持氧气有效的运输到全身各处。红细胞的生命周期较短，仅有120天，每小时有100亿的红细胞生成，也有无数衰老的红细胞被巨噬细胞吞噬清除。然而巨噬细胞是如何区分年轻和衰老的红细胞，只进攻衰老红细胞的机理却不为人知。直到2000年，Oldenborg等人证实CD47是细胞表面一个重要的“self”标记，是调节巨噬细胞吞噬作用的一个重要信号。CD47可以与巨噬细胞表面SIRPα结合，磷酸化其ITIM，随后招募SHP-1蛋白，产生一系列的级联反应抑制巨噬细胞的吞噬作用。年轻的红细胞表达较高的CD47向巨噬细胞释放“自己人，别吃我”的信号，而衰老的红细胞CD47下调，最终被巨噬细胞清除。

不同的研究表明，几乎所有的肿瘤细胞和组织都高表达CD47。肿瘤细胞表面高表达的CD47通过与巨噬细胞表面SIRPα结合，释放“不要吃我”的信号，导致肿瘤组织浸润区的巨噬细胞不但同肿瘤细胞和谐相处，而且还会通过促进肿瘤内血管增殖，抑制效应T细胞发挥作用，促进肿瘤细胞扩增和生长。多个研究表明在细胞水平上，通过阻断SIRPα-CD47之间的相关作用可有效激活巨噬细胞对癌细胞的吞噬作用，在体内通过CD47抗体阻断SIRPα-CD47之间的相关作用可有效的抑制肿瘤在小鼠体内的生长。

针对阻断SIRPα-CD47信号通路已有多种抑制剂的研究报道，包括FortySevern公司的抗CD47单抗Hu5F9-G4(US9382320B2)、Celgene公司的单抗CC9002(专利US9045541B2)、信达生物的单抗ADI-26630(专利CN201710759828.9)、天境生物的单抗13H3/1F8(专利CN201780003451)等，此外还有TRILLIUMTHERAPEUTICS，INC.公司的双功能融合蛋白TTI-621(专利US20150329616A1)、ALX公司的ALX148(专利US20160186150A1)等，目前处于临床PhaseI/II。临床初步结果显示与CD20联合治疗CD20复发或难治性滤泡性淋巴瘤(FL)及大B细胞淋巴瘤(DLBCL)取得了令人惊喜的疗效，ALX148联合Trastuzumab、Pembrolizumab在胃癌(GC)、头颈癌(HNSCC)、非小细胞肺癌(NSCLC)都显示了一定的疗效。迄今CD47抑制剂(包括单抗、SIRPα融合蛋白)与CD20、HER2、PD-1等多个抗体抑制剂处于临床研究进展中。