[发明专利]一种用于检测钙需求相关基因SNP位点的试剂盒及应用

说明书

本发明提供一种用于检测钙需求相关基因SNP位点的试剂盒及应用，该试剂盒包括用于检测钙需求相关的GC基因RS2282679位点、IL‑6基因RS1800795位点、PTH基因RS6254位点、VDR基因RS1544410位点和VDR基因RS2228570位点的引物组合物，包括5对PCR引物和5个正向延伸引组合物，如SEQ ID No:1‑15所示，本发明不仅能够快速同步检测多个SNP位点,对与钙需求相关的基因SNP位点进行有效的基因分型，而且有效提高了多数量的SNP位点在一个反应体系中分型的准确性且检测限低，实现快速而准确地给出钙质补充的指导意见。

技术领域

本发明涉及基因多态性检测技术领域，特别涉及一种用于检测钙需求相关基因SNP位点的试剂盒及应用。

背景技术

钙是人体内含量最多的矿物元素，广泛存在于身体的各个部分。绝大多数钙元素沉积于骨骼和牙齿中，既组成人体的支架，又是机体内钙元素的储存库，而只有1％的钙存在于人体的软组织、细胞外液及血液中。软组织和血液中的钙又叫“混合钙池”，与骨骼中的钙保持着动态平衡，完成多种生理功能，钙在神经冲动的传递、神经与肌肉应激、血液凝固、心跳节律的维持、人体代谢酶的激活等许多生理过程中起重要的作用。

当长期钙摄入不足，机体势必动用大量的骨钙来维持体液钙的水平，影响骨骼健康。在儿童身上会引起佝偻病，成人则会发生严重骨质疏松。科学研究表明，人体需钙量在不同时期存在差异，膳食营养中的摄入的钙质并不全能被人体吸收利用，被肠道吸收后通过血循环沉积到骨骼中，部分经肠道、肾脏等途径排出体外。在这一系列过程中，不仅与多种营养元素相互作用，还受到多种激素的调控。因此，遗传因素的影响是一个重要方面，不同基因型、不同遗传体质的人群钙吸收代谢能力存在差异，特别是儿童、青少年人群，处于生长发育旺盛时期，对钙的需求量高，钙的足量摄入尤为重要，一旦钙在体内的吸收代谢过程发生障碍，不但影响到儿童的正常生长发育，还可导致儿童时期的佝偻病，低钙性手足搐搦，孕妇骨矿含量下降、牙齿损害和骨质疏松等问题。

从遗传角度评估人群个体对钙元素的需求程度，通过基因检测来评估个体对钙需求的情况，以及时进行干预，指导合理补充。但对于钙需求相关基因的检测，现有采用的Sanger测序、Taqman法、高分辨率溶解曲线等检测，往往存在通量低，操作步骤繁琐，并且为了更加全面合理地指导钙质补充，随着检测位点的增多时，对于大通量地检测多基因位点反而容易出现特异性和灵敏度低，上样量高，检出率和检测效率降低、准确度低的问题，因而始终无法将其有效应用于评估个体对于钙需求的差异，以指导补充钙质的遗传检测中。

发明内容

鉴以此，本发明提出一种用于检测钙需求相关基因SNP位点的试剂盒及应用，该试剂盒不仅能够快速同步检测多个SNP位点,对与钙需求相关的基因SNP位点进行有效的基因分型，而且有效提高了更多数量的SNP位点在一个反应体系中分型的准确性且检测限低，反应电泳图谱结果稳定清晰，实现快速而准确地给出钙质补充的指导意见。

本发明的技术方案是这样实现的：

一种用于检测钙需求相关基因SNP位点的试剂盒，包括用于检测钙需求相关的GC基因RS2282679位点、IL-6基因RS1800795位点、PTH基因RS6254位点、VDR基因RS1544410位点和VDR基因RS2228570位点的引物组合物，所述引物组合物的序列为：

GC基因RS2282679位点的正反向PCR引物：SEQ ID No:1-2，正向延伸引物：SEQ IDNo:11；

IL-6基因RS1800795位点正反向PCR引物：SEQ ID No:3-4，正向延伸引物：SEQ IDNo:12；

PTH基因RS6254位点正反向PCR引物：SEQ ID No:5-6，正向延伸引物：SEQ ID No:13；

VDR基因RS1544410位点正反向PCR引物：SEQ ID No:7-8，正向延伸引物：SEQ IDNo:14；