[发明专利]真空辅助的纳升液相色谱柱填充装置及填充方法

说明书

本发明涉及色谱柱填充技术领域，本发明的技术方案为：真空辅助的纳升液相色谱柱填充装置，包括氮气瓶和与所述氮气瓶相连接的毛细管填柱仪，所述毛细管填柱仪通过毛细管色谱柱与真空腔体相连接，所述真空腔体还与真空泵相连接；所述毛细管填柱仪内部固定有1.8ml的离心管，所述离心管中盛有填料和甲醇悬浊液，所述毛细管色谱柱的末端插入至离心管的底部。本发明的真空腔装置体积小能够迅速达到理想的真空状态；真空泵压力可调节方便控制调料的填充速度；本发明将废气和废液通过真空泵抽走，过滤后再排到空气中，不再产生废液，同时废气也得到过滤，几乎可以消除对环境的污染。

技术领域

本发明涉及色谱柱填充技术领域，尤其涉及到真空辅助的纳升液相色谱柱填充装置及填充方法。

背景技术

液相色谱质谱联用技术被广泛应用于检测复杂样本中的物质组成和含量，其结果的质量和稳定性有很大程度依赖于色谱柱这一重要组成部件。在液质联用技术的重要应用领域高通量蛋白质组学分析中，最常见的液相色谱装置是纳升液相色谱及配套的毛细管色谱柱，这一体系因为具有低流速良好结果重现性而被作为相关研究领域的“金标准”。毛细管色谱柱的柱效会随着检测次数的增加而逐渐降低，从而导致实验结果的重现性变差，因此在实验过程中需要经常更换毛细管色谱柱这一部件。针对以上问题，本发明拟设计一套真空辅助的纳升液相色谱柱填充装置及填充方法，该装置能够高效制备适用于蛋白质组学分析常见各种规格的毛细管色谱柱，适应不同检测需求。

商业化的适用于纳升液相色谱的毛细管色谱柱成本较高，对于常规样品检测，一般更为广泛采用的是自己制备的毛细管色谱柱，目前已经有产品化毛细管填柱机，该产品利用外接氮气提供压力从而将分散的色谱柱填料压入已经拉制好的毛细管中，但该产品对粒径较大的填料能够较好完成填充。当填料颗粒粒径较小时，填充速度将会明显下降。为了提高填充效率，需要对现有装置进行改造，实现对较小粒径化学填料的填充速度的提升。

市面上常见的毛细管柱填充仪一般将毛细管尖端放置于空气中，这使得毛细管填料的填充速度较低；而且，现有的部分毛细管填柱仪将剪短放置在空气中，填充过程中产生的废气和废液直接排到空气中，会产生环境的污染。

因此，我们有必要对这种情况进行改善，以克服上述缺陷。

发明内容

本发明的目的是提供真空辅助的纳升液相色谱柱填充装置及填充方法。

本发明的上述技术目的是用过以下技术方案实现的：

真空辅助的纳升液相色谱柱填充装置，包括氮气瓶和与所述氮气瓶相连接的毛细管填柱仪，所述毛细管填柱仪通过毛细管色谱柱与真空腔体相连接，所述真空腔体还与真空泵相连接；

所述毛细管填柱仪内部固定有1.8ml的离心管，所述离心管中盛有填料和甲醇悬浊液，所述毛细管色谱柱的末端插入至离心管的底部。

本发明的进一步设置为：所述氮气瓶与所述毛细管填柱仪通过铜管相连接；所述真空腔体与所述真空泵通过金属管路相连接。

本发明的进一步设置为：所述氮气瓶的出气口端设置有阀门。

本发明的进一步设置为：所述离心管和所述毛细管色谱柱均呈竖直设置，所述毛细管填柱仪的侧部具有一进气口，所述毛细管填柱仪的顶部具有色谱柱出口，铜管一端与氮气瓶相连接，铜管的另一端与毛细管填柱仪的进气口相连接。

本发明的进一步设置为：所述毛细管色谱柱为空管，所述色谱柱的顶端内设有筛板。

本发明的进一步设置为：所述真空泵还与过滤装置相连接。

真空辅助的纳升液相色谱柱填充装置的填充方法，包括如下步骤：

S1)将色谱柱填料混悬在甲醇中并且加入离心管内，然后将离心管放置于毛细管填柱仪内并固定；