[发明专利]利用高效液相色谱法检测GLP-1或其类似物的方法在审

专利信息
申请号: 202010214753.8 申请日: 2020-03-24
公开(公告)号: CN111208242A 公开(公告)日: 2020-05-29
发明(设计)人: 潘兰;冯艳;张均;龚庆伟;蒋燕;李康;高相雷;郭林峰;李晓平;陈小锋;李文佳 申请(专利权)人: 东莞市东阳光生物药研发有限公司;广东东阳光药业有限公司
主分类号: G01N30/06 分类号: G01N30/06;G01N30/74
代理公司: 北京睿阳联合知识产权代理有限公司 11758 代理人: 郭奥博;张颖
地址: 523871 广东省东莞市*** 国省代码: 广东;44
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摘要:
搜索关键词: 利用 高效 色谱 检测 glp 类似物 方法
【权利要求书】:

1.一种利用高效液相色谱法检测GLP-1或其类似物的方法,该方法使用流动相A和流动相B对含有GLP-1或GLP-1类似物的样品进行洗脱,其特征在于,所述流动相A由钠盐溶液和有机溶剂组成,流动相B由有机溶剂和水溶液组成;

所述钠盐选自硫酸钠、氯化钠、乙酸钠和磷酸钠溶液中的一种或两种,所述有机溶剂选自甲醇、乙醇、异丙醇和乙腈中的一种或两种。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述流动相A中的钠盐为硫酸钠,所述流动相A中硫酸钠的浓度为10~50g/L,优选为15~40g/L,进一步优选为20~35g/L,更优选为23~28g/L。

3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述流动相A中的有机溶剂为乙腈,所述流动相A中乙腈的体积百分比为5%~20%,优选为10%~15%。

4.根据权利要求1~3任意一项所述的方法,其特征在于,所述流动相A的pH值为2.0~4.5,优选为2.5~3.5;

优选地,调节所述流动相A的pH值的调节剂为磷酸缓冲溶液。

5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述流动相B中有机溶剂为乙腈,所述流动相B中乙腈的体积分数为60%~80%,优选为70%。

6.根据权利要求1~5任意一项所述的方法,其特征在于,所述洗脱为梯度洗脱;

优选地,所述梯度洗脱的方式为:以流动相A和流动相B的总体积为100%,所述流动相A所占的体积百分比由80%递减至30%,余量为流动相B。

7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述梯度洗脱的方式为:以流动相A和流动相B的总体积为100%;0~8分钟,所述流动相A的体积百分比由80%递减至65.5%,余量为流动相B;8~29分钟,所述流动相A的体积百分比保持65.5%,余量为流动相B;29~32分钟,所述流动相A的体积百分比由65.5%递减至30%,余量为流动相B;32~40分钟,所述流动相A的体积百分比保持30%,余量为流动相B。

8.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述洗脱所使用的色谱柱为C18柱,优选为Waters X-select CSH C18填充柱。

9.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述高效液相色谱法的色谱柱柱温为35~45℃;

和/或,所述样品的进样体积为1~10μL,优选为4~6μL;

和/或,所述高效液相色谱法的流动相流速为0.5~5mL/min,优选为1~2mL/min;

和/或,所述高效液相色谱法的检测波长为210~218nm;优选为214nm。

10.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述GLP-1或所述GLP-1类似物选自GLP-1(1-37)、利拉鲁肽中间体、艾塞那肽、阿必鲁肽、利司那肽。

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