[发明专利]一种羌活中紫花前胡苷单体的分离纯化方法

说明书

本发明公开了一种羌活中紫花前胡苷单体的分离纯化方法,属于中药单体化合物提取技术领域。本发明是以伞形科植物羌活的根茎为原料,通过超声提取、二氯甲烷萃取、溶解过滤、液相‑质谱分析、高效制备液相色谱分离、产品收集、产品重结晶及分析型高效液相色谱法纯度检验步骤分离得到高纯度紫花前胡苷单体。本发明通过最适宜的工艺及参数条件,使产品中紫花前胡苷的含量达到99.0％以上，整个工艺过程稳定,操作简便,分离效率高,成本低廉,可大量高纯度分离制备紫花前胡苷单体。

技术领域

本发明涉及一种植物化合物单体的制备纯化方法，属于中药单体化合物单体提取技术领域，尤其涉及一种羌活中紫花前胡苷单体的分离纯化方法。

背景技术

羌活(Rhizoma et Radix Notopterygii)为伞形科植物羌活Notopterygiumincisum Ting ex H.T.Chang或宽叶羌活Notopterygium forbesii Boiss.的干燥根茎及根。羌活性温味苦、辛，入膀胱、肾经。具有散表寒去风湿，利关节之功效。治外感风寒、头痛无汗、风寒湿痹、项强筋急、骨节酸痛、风水浮肿、痛肿疮毒等。

紫花前胡苷，英文名称：Nodakenin，分子式：C₂₀H₂₄O₉，分子量：408.41，结构式如下：

紫花前胡苷来源于伞形科羌活属植物羌活的干燥根茎，是羌活药材中主要有效活性成分之一，具有镇痛、抗炎等作用。

根据相关检索可知，目前对于紫花前胡苷单体的精制主要采用常规硅胶柱层析和结晶相结合的方法，不能分离出原料中极性小的物质，且其生产周期长，试剂污染严重，损耗大，产品回收率较低，分离效果不好，易造成资源浪费，同时存在浓缩蒸干，造成目标产品和仪器的破坏和纯度降低的问题。

发明内容

针对上述存在的问题，本发明旨在提供一种羌活中紫花前胡苷单体的分离纯化方法，以羌活的根茎为原料，通过超声提取、萃取、溶解过滤、液相-质谱分析、高效制备液相色谱分离、产品收集、产品重结晶及反相分析型高效液相色谱法纯度检验步骤，分离得到高纯度紫花前胡苷单体。本方法分离效率高，生产周期短，操作简便，成本低廉，可实现大量紫花前胡苷单体的纯度达99.0％以上的分离制备。

为了实现上述目的，本发明所采用的技术方案如下：一种羌活中紫花前胡苷单体的分离纯化方法，以羌活的根茎为原料，其特征在于：通过超声提取、二氯甲烷萃取、溶解过滤、液相-质谱分析、高效制备液相色谱分离、产品收集、产品重结晶及反相分析型高效液相色谱法纯度检验步骤，分离得到高纯度紫花前胡苷单体。

具体的，包括以下步骤：

a、超声提取

将羌活根茎粉碎成1-5mm粒径的粗粉，按照体积比质量(ml/g)加入5-10倍体积的50％-95％乙醇溶液，超声提取3-5次，1-2h/次，合并提取液，将乙醇溶剂回收，提取得到浓缩液；

b、二氯甲烷萃取

在步骤a所得的浓缩液中加入等体积的二氯甲烷，萃取2-4次，分取萃取下层溶液，得到提取液，再次在提取液中加入等体积正丁醇，萃取3-5次，合并正丁醇溶液，浓缩至干，得到固体提取物；

c、溶解过滤

在步骤b所得的固体提取物中，按照体积比质量(ml/g)，加入5-10倍体积的甲醇，溶解过滤，得到0.45um滤膜过滤，得到制备溶液Ⅰ；

d、液相-质谱分析

将步骤c中的制备溶液Ⅰ取样1-5ul，进行高效液相质谱分析：

色谱柱填料：C18填料，粒径：1-5um；