[发明专利]一种测定鸡肉中喹诺酮类兽药残留的方法

说明书

本发明公开了一种测定鸡肉中喹诺酮类兽药残留的方法，它先配制、混合标准品工作溶液、样品溶液、线性溶液、空白溶液、加标回收试验样品溶液，再用三柱二维液质联用法测定，得到曲线方程斜率、曲线方程截距、最后结果分析及验证结构。本发明将三柱二维凝胶色谱‑串联质谱联用技术应用于鸡肉中喹诺酮类药物的快速、高效、灵敏的检测，它利用凝胶色谱的体积排阻原理，实现目标化合物与基质的分离，去除基质干扰；利用在线柱切换液相‑质谱联用技术，实现喹诺酮类药物残留在线净化目的，提高了检测效率，方法前处理简单，检测周期短，相对于其他方法具有绿色环保，快速、准确等特点，人为干预因素减少，同时还具有有机溶剂消耗小，成本低的特点。

技术领域

本发明属于食品安全检测技术领域，具体涉及一种测定鸡肉中喹诺酮类兽药残留的方法。

现有技术

喹诺酮类药物具有抗菌效果明显、性质稳定、价格便宜等优点，是用于预防和治疗细菌感染性疾病的化学药物，目前被广泛应用于畜禽等疾病防治。在畜牧业生产中，使用抗菌药物无疑会提高生产效率，并带来巨大经济效益，但由于上述药物存在使用不当可导致动物源性食品中药物的残留，且在动物体内无法代谢完全，其残留量通过食物链进入人体，进而对人体健康构成危害，如骨关节病、中枢神经反应、泌尿道反应、肝肾毒性和消化系统疾病等。目前许多国家和地区均通过各种途径来控制或降低畜产品中的药剂残留量，以保护消费者的安全。然而，在经济利益的驱动下，养殖业中存在非法添加兽药的现象，为了保护人民的身体健康，必须从在各个环节上确保畜产品的安全，从源头进行控制的有效手段。因此研究食品中喹诺酮类兽药残留检测方法具有重要的意义。

目前对动物源性食物中的喹诺酮类兽药残留的理化分析方法主要有高效液相色谱法(HPLC)，高效液相色谱荧光检测法测定牛奶中4种氟喹诺酮类药物残留，廖洁丹、和高效液相色谱质谱联用法等(LC/MS)。LC方法专属性不高，不适用于复杂基质中痕量组分的测定。液相色谱-串联质谱法具有较高的专属性和灵敏度，常用于药物的多残留分析，但目前文献的前处理过程均较为复杂，分析周期较长，有些化合物受到基质干扰严重。随着人们对食品样品复杂体系的分离分析要求不断提高，传统的一维液相色谱的峰容量和分离度比较有限，已经不能满足食品分析。因此在一维液相色谱理论和相关技术的基础之上，诞生了多维液相色谱这一结合多种分离方式的技术手段，其中二维液相色谱作为多维液相色谱的主体，已成为食品分析研究的重要方向。二维液质联用技术可以将凝胶净化柱净化与分离分析系统相连，实现在线净化，样品经过相应的试剂提取后不再需要人工净化等操作，直接由系统进样后净化，然后通过在线柱切换直接导入质谱系统进行分析，减少了人工操作带来的不确定性，节约了试剂，节约了时间，减少了工作量。该平台的建立，能够对兽药残留的突发性食品安全事件进行快速的响应，在最短时间内快速的确定安全事件的兽药残留来源，为突发事件的应对和控制提供有效的数据支持和技术保障。

发明内容

针对现有技术中存在的上述问题，本发明的目的在于提供一种测定鸡肉中喹诺酮类兽药残留的方法。

所述的一种测定鸡肉中喹诺酮类兽药残留的方法，其特征在于包括如下步骤：

1)混合标准品工作溶液的配制：分别精密移取0.1mL1.0mg/mL的8种喹诺酮类药物诺氟沙星、依诺沙星、环丙沙星、洛美沙星、氧氟沙星、马坡沙星、沙氟沙星和奥比沙星储备液至10mL容量瓶中，用甲醇定容，再精密移取1mL混合液至另一10mL容量瓶中，用甲醇定容，制成1mg/L的混合标准品工作溶液，于4℃下保存备用；

2)样品溶液的制备：取待测鸡肉制品，置50mL高速离心管中，精密加入乙腈20mL，高速匀浆1-3min，于4000-5000r/min离心4-6min，取15-20mL上清液氮气吹干，残渣用0.75-1mL 10％甲醇水溶液复溶，制得样品溶液备用；