[发明专利]一种测定植株中癸甲氯铵的方法

说明书

本发明公开了一种测定植株中癸甲氯铵的方法，采用冷冻干燥+酸化有机溶剂提取+Florisil土净化作为植株样品前处理技术，采用UPLC‑MS/MS作为样品的检测技术，从设备、材料和技术层面优化了整个操作流程。该组合技术分析植株中的癸甲氯铵，具有简便易行、准确、高选择性的技术优势，为建立植株中癸甲氯铵检测的标准方法提供重要参考，为评估我国经济类和食用类植物农产品中癸甲氯铵残留现状，以及有机食品认证工作提供重要的方法依据，本方法可应用于多种植物体中癸甲氯铵的检测研究。

技术领域

本发明涉及植物检测领域，具体是一种测定植株中癸甲氯铵的方法。

背景技术

癸甲氯铵，又称二癸基二甲基氯化铵，属阳离子表面活性剂，其季铵阳离子能主动吸引并富集于带负电荷的细菌和病毒表面，阻碍细菌代谢，导致其膜的通透性发生改变。可广泛应用于各种养殖场、宠物诊所的舍内环境、饮水、动物体表、奶牛及母猪乳房、种蛋、各种设备及器具、车辆、工作人员的消毒。同时，由于癸甲氯铵大量使用，导致其随着废水、废渣排放，引起环境残留和污染，癸甲氯铵在环境中不易降解，尤其在厌氧条件(如污泥、沉积物等)可稳定存在，对环境生物产生毒性，并对人类健康产生威胁。欧盟委员会法规(COMMISSION REGULATION(EU)No 1119/2014)明确癸甲氯铵不是批准的植保产品，出于环境安全和人体健康影响，应加强对其的环境监测与监管。然而，国际上关于癸甲氯铵的检测方法并没有获得ISO17025的认可，我国目前也没有建立该物质检测的国家标准，我国OFDC面临失去欧盟的认可的危机。

癸甲氯铵在水和有机溶剂中均有较好的溶解性，其长碳链和N+离子的结构决定其更易于在土壤或沉积物中吸附。同时，其急性毒性LC₅₀(96h)值为1.15mg/L，对水生生物具有潜在的威胁。目前关于癸甲氯铵的研究报道主要集中于杀菌、消毒等性能，或者生产配方等方面，对于植物中环境介质中的残留分析方法鲜有报道。Cao H W以水-甲醇混合溶剂作为萃取剂，以弱阳离子交换柱进行固相萃取，建立了苹果、菠菜和水稻中5种季铵盐的分析方法；该方法如应用于癸甲氯铵的检测存在三方面的问题：一是未调节提取液的pH，减少了分子离子化的比率，样品的回收稳定性值得商榷；二是样品浓缩过程，由于甲醇自身的理化特性，低温浓缩将会耗时较长，增加目标物的损失风险；三是采用GC-MS分析，仪器的灵敏度和稳定性较UPLC-MS/MS法差。因此，研究一种高效、直接的测定植株中癸甲氯铵的方法十分必要。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的不足，提供一种简便易行、准确、高效地测定植株中癸甲氯铵的方法。

为了实现上述目的，本发明采取的技术方案如下：

一种测定植株中癸甲氯铵的方法，包括如下步骤：

(1)除去待检测植株上附着的杂土，以及枯枝烂叶，进行真空冷冻干燥，以去除样品中的水份，然后经研磨得到粉末状或纤维状的植株样品；

(2)将甲酸、乙腈和超纯水混合得到酸性提取溶液，加入到步骤(1)得到的植株样品中，摇匀后恒温超声提取，然后经离心、过滤分离出上清液并于4℃以下保存；

(3)在步骤(2)得到的上清液中加入Florisil土，用涡旋仪将两者充分混合净化，然后离心后用0.22μm滤膜过滤，得到检测液；

(4)采用UPLC-MS/MS测定步骤(3)检测液中的癸甲氯铵含量。

具体地，步骤(1)中，所述真空冷冻干燥的真空度控制在100pa以下，温度控制在-70℃以下，冷冻干燥24h-48h；在进行真空冷冻干燥之前，将待检测植株在-20℃冰箱中预冻24h以上。采用手动或经研磨机研磨干化植株，研磨成粉末状最佳，对于草类、稻杆等，破碎成纤维状即可。同时称取一定质量的新鲜植株，采用称重法测定样品含水率。冻干法相比阴干法，缩短了干燥时间；相比烘干法，避免目标物因高温产生挥发、分解等物理化学变化。