[发明专利]含糖链目标物质的检测方法和试剂、检测用载体及其制造方法

权利要求书

1.用于检测含与多花紫藤(Wisteria floribunda)的凝集素(WFA)结合的糖链的目标物质的试剂，其特征在于，

含有所述WFA二聚体化的二聚体WFA固定化于固相载体的二聚体WFA固定化载体，

所述二聚体WFA是由含生物素的交联剂二聚体化的生物素化二聚体WFA，

含所述生物素的交联剂有选自N-羟基琥珀酰亚胺酯基、异硫氰基、氯砜基、氯羰基、氧乙烯基、碳原子数1～4的氯烷基、醛基及羧基的至少1种官能团，

所述固相载体是固定化了生物素结合蛋白质的固相载体，

所述生物素化二聚体WFA经所述生物素结合蛋白质而固定化于所述固相载体。

2.含与多花紫藤(Wisteria floribunda)的凝集素(WFA)结合的糖链的目标物质的检测方法，其包括：

(A)通过使所述WFA二聚体化的二聚体WFA固定化于固相载体的二聚体WFA固定化载体、含所述目标物质的试样和与所述目标物质特异性地结合的标记物质接触，在所述固相载体上形成含所述二聚体WFA、所述目标物质和所述标记物质的复合物的工序、及

(B)通过对在所述工序(A)中得到的复合物中的标记物质进行测定，检测所述目标物质的工序

其中所述二聚体WFA固定化载体是：

所述二聚体WFA是由含生物素的交联剂二聚体化的生物素化二聚体WFA，

含所述生物素的交联剂有选自N-羟基琥珀酰亚胺酯基、异硫氰基、氯砜基、氯羰基、氧乙烯基、碳原子数1～4的氯烷基、醛基及羧基的至少1种官能团，

所述固相载体是固定化了生物素结合蛋白质的固相载体，

所述生物素化二聚体WFA经所述生物素结合蛋白质而固定化于所述固相载体。

3.权利要求2所述的方法，其中所述标记物质是与所述目标物质特异性地结合的标记抗体。

4.用于检测含与多花紫藤(Wisteria floribunda)的凝集素(WFA)结合的糖链的目标物质的载体，其特征在于，

有所述WFA二聚体化的二聚体WFA和固相载体，

所述二聚体WFA固定化于所述固相载体上，

所述二聚体WFA是由含生物素的交联剂二聚体化的生物素化二聚体WFA，

含所述生物素的交联剂有选自N-羟基琥珀酰亚胺酯基、异硫氰基、氯砜基、氯羰基、氧乙烯基、碳原子数1～4的氯烷基、醛基及羧基的至少1种官能团，

所述固相载体是固定化了生物素结合蛋白质的固相载体，

所述生物素化二聚体WFA经所述生物素结合蛋白质而固定化于所述固相载体。

5.用于检测含与多花紫藤(Wisteria floribunda)的凝集素(WFA)结合的糖链的目标物质的载体的制造方法，其包括：

(I)使所述WFA二聚体化而得到二聚体WFA的工序、及

(II)将在所述工序(I)中得到的二聚体WFA固定化于固相载体而得到二聚体WFA固定化载体的工序，

其中

在所述工序(I)中，将含有含生物素的交联剂的溶液和WFA混合而调制生物素化二聚体WFA，

在所述工序(II)中，作为所述固相载体，使用固定化了生物素结合蛋白质的载体，通过使所述载体中的生物素结合蛋白质和所述生物素化二聚体WFA结合而将所述二聚体WFA固定化于所述固相载体，

所述交联剂是与所述二聚体WFA中的氨基形成交联的交联剂，有选自N-羟基琥珀酰亚胺酯基、异硫氰基、氯砜基、氯羰基、氧乙烯基、碳原子数1～4的氯烷基、醛基及羧基的至少1种官能团作为对于所述二聚体WFA中的氨基的反应基。

6.权利要求5所述的方法，其中在所述工序(I)中，通过使含有所述交联剂的溶液和所述WFA以〔WFA/交联剂〕的摩尔比成为1/10以下(但不含0)的方式接触，得到所述二聚体WFA。

7.权利要求5所述的方法，其中所述生物素和所述反应基经间隔物结合。