[发明专利]抗人转化生长因子β1的纳米抗体及其制备方法和应用有效

专利信息
申请号: 202010227673.6 申请日: 2020-03-27
公开(公告)号: CN111440238B 公开(公告)日: 2022-09-20
发明(设计)人: 张建民;王玥 申请(专利权)人: 国典(北京)医药科技有限公司
主分类号: C07K16/22 分类号: C07K16/22;C12N15/13;C12N15/70;C12N1/21;A61K45/06;A61K39/395;A61P35/00;C12R1/19
代理公司: 北京尚诚知识产权代理有限公司 11322 代理人: 叶占洋;鲁兵
地址: 100176 北京市大兴区*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 转化 生长因子 纳米 抗体 及其 制备 方法 应用
【权利要求书】:

1.抗人转化生长因子β1的纳米抗体,其特征在于,所述纳米抗体的氨基酸序列为以下a)-d)中的任一项:

a)序列表中SEQ ID NO:10所示的氨基酸序列;

b)序列表中SEQ ID NO:12所示的氨基酸序列;

c)序列表中SEQ ID NO:14所示的氨基酸序列;

d)序列表中SEQ ID NO:16所示的氨基酸序列。

2.编码权利要求1所述的纳米抗体的氨基酸序列的核苷酸编码序列。

3.根据权利要求2所述的核苷酸编码序列,其特征在于,所述核苷酸编码序列为以下a’)-d’)中的任一项:

a’)序列表中SEQ ID NO:11所示的核苷酸序列;

b’)序列表中SEQ ID NO:13所示的核苷酸序列;

c’)序列表中SEQ ID NO:15所示的核苷酸序列;

d’)序列表中SEQ ID NO:17所示的核苷酸序列。

4.一种含有权利要求2或3所述的核苷酸编码序列的表达载体。

5.根据权利要求4所述的表达载体,其特征在于,所述表达载体为将权利要求2或3所述的核苷酸编码序列插入pGEX6P.1原核表达载体中获得。

6.一种含有权利要求4或5所述的表达载体的宿主细胞,其特征在于,所述宿主细胞包括但不限于大肠杆菌DH5α感受态细胞、大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞。

7.权利要求1所述的纳米抗体的制备方法,其包括以下步骤:

1)构建表达融合蛋白TGF-β1的重组质粒,表达并纯化获得经纯化的融合蛋白TGF-β1;

2)使用步骤1)获得经纯化的融合蛋白TGF-β1作为抗原免疫羊驼;

3)筛选能够与经纯化的融合蛋白TGF-β1具有高结合力的基因序列;

4)将步骤3)获得的基因序列进行蛋白诱导表达。

8.根据权利要求7所述的制备方法,其特征在于,步骤3)中所述筛选采用亲和淘筛的方法。

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