[发明专利]猪乙型脑炎疫苗抗原规模培养方法有效
| 申请号： | 202010241654.9 | 申请日： | 2020-03-31 |
| 公开（公告）号： | CN111394319B | 公开（公告）日： | 2021-04-13 |
| 发明（设计）人： | 周远成;邝声耀;阴文奇 | 申请（专利权）人： | 四川省畜牧科学研究院;畜科生物工程有限公司 |
| 主分类号： | C12N7/00 | 分类号： | C12N7/00;A61K39/12;A61P31/14;C12R1/93 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人： | 秦梦楠 |
| 地址： | 610066*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 猪乙型 脑炎 疫苗 抗原 规模 培养 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种猪乙型脑炎疫苗抗原培养方法，包括如下步骤：
(1)将猪乙型脑炎病毒接种于PK-15细胞，接种的病毒量为0.4～10MOI；
(2)完成步骤(1)后，继续培养细胞48h后开始连续收获病毒；每次收获方式如下：收集细胞培养液，从细胞培养液中获得病毒，并且添加新的细胞培养液继续培养细胞直至下次收获病毒；所述新的细胞培养液为含有体积百分含量2％小牛血清的DMEM细胞培养液；
所述病毒通过病毒液的形式接种至PK-15细胞；所述病毒液采用含有体积百分含量2％小牛血清的DMEM细胞培养液配置；
将病毒接种于细胞后吸附1h，然后添加含有体积百分含量2％小牛血清的DMEM细胞培养液继续培养至收获病毒；
完成步骤(1)后，在继续培养细胞的第48h至192h期间连续收获病毒，每次收获病毒间隔24h或48h或72h；
所述猪乙型脑炎病毒为猪乙型脑炎病毒JEV-SC-1株。
2.如权利要求1所述的方法，其特征在于：接种的病毒量为0.6～3MOI。
3.如权利要求1或2所述的方法，其特征在于：分别在继续培养细胞的第48h、96h、120h、144h、168h和192h收获病毒。
4.权利要求1至3任一所述的方法在规模化生产猪乙型脑炎疫苗中的应用。
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