[发明专利]一种基于重组酶聚合酶扩增技术检测半乳糖的方法在审
| 申请号： | 202010242484.6 | 申请日： | 2020-03-31 |
| 公开（公告）号： | CN111235235A | 公开（公告）日： | 2020-06-05 |
| 发明（设计）人： | 赵国杰;段絮英 | 申请（专利权）人： | 中国医科大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6844 | 分类号： | C12Q1/6844;C12Q1/54 |
| 代理公司： | 沈阳亚泰专利商标代理有限公司 21107 | 代理人： | 史力伏 |
| 地址： | 110122 辽*** | 国省代码： | 辽宁;21 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 基于 重组 聚合 扩增 技术 检测 半乳糖 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种基于重组酶聚合酶扩增技术检测半乳糖的方法，其特征在于：利用GalR与核酸序列结合能力受D-gal特异性调控的作用，将GalR识别序列构建在RPA的扩增模板上，然后将该模板和GalR加入RPA扩增体系，使GalR阻断聚合酶对RPA引物的延伸反应，D-gal的特异性加入，降低了GalR结合扩增模板的能力，降低程度与D-gal浓度正相关，与产生的扩增产物呈正相关，通过绘制半乳糖浓度与RPA扩增产物散点图，拟合线性相关程度，用于计算样品中未知半乳糖浓度。
2.按照权利要求1所述基于重组酶聚合酶扩增技术检测半乳糖的方法，其特征在于：所述的RPA的扩增模板是含有GalR识别序列的DNA。
3.按照权利要求1所述基于重组酶聚合酶扩增技术检测半乳糖的方法，其特征在于：所述的RPA扩增引物，是包括上下游引物的，扩增区域包含GalR识别序列的引物。
4.按照权利要求1所述基于重组酶聚合酶扩增技术检测半乳糖的方法，其特征在于：所述的GalR蛋白是来自于大肠杆菌操纵子的受D-gal调控的阻遏蛋白GalR。
5.按照权利要求1所述基于重组酶聚合酶扩增技术检测半乳糖的方法，其特征在于：所述用于绘制标准曲线溶液中所用半乳糖浓度范围：0.0625-1 mM。
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