[发明专利]一种用于新型冠状病毒扩增引物及其应用在审
申请号: | 202010243513.0 | 申请日: | 2020-03-31 |
公开(公告)号: | CN111270016A | 公开(公告)日: | 2020-06-12 |
发明(设计)人: | 朱洪伟;张兴晓;张建龙;姜琳琳;黄清荣;于馨;陈国忠 | 申请(专利权)人: | 鲁东大学 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6844;C12Q1/6806;C12N15/11 |
代理公司: | 昆明合众智信知识产权事务所 53113 | 代理人: | 张玺 |
地址: | 264025 山东*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 新型 冠状病毒 扩增 引物 及其 应用 | ||
1.一种用于新型冠状病毒扩增的引物,其特征在于,包括至少一个能够识别新型冠状病毒N基因上的特异区域的寡核苷酸引物,新型冠状病毒N基因上的特异区域的序列范围包括新型冠状病毒参考毒株基因组28778-28971的区域序列。
2.根据权利要求1所述一种用于新型冠状病毒扩增的引物,其特征在于,包括引物22LoopF和/或引物22LoopB,以新型冠状病毒参考毒株基因组为参考基因组,引物22LoopF的序列包括与参考基因组第28834-28853位区域序列反向互补的序列;引物22LoopB的序列包括与参考基因组第28912-28930位区域一致的序列。
3.根据权利要求2所述一种用于新型冠状病毒扩增的引物,其特征在于,引物22LoopF的核苷酸序列包括SEQ ID NO:5所示核苷酸序列;引物22LoopB的核苷酸序列包括SEQ IDNO:6所示核苷酸序列。
4.根据权利要求1-3任一项所述一种用于新型冠状病毒扩增的引物,其特征在于,包括引物22F3、引物22B3、引物22FIP、引物22BIP中的一个或任几个;所述引物22FIP包括22F1c和22F2寡核苷酸片段,引物22BIP包括22B1c和22B2寡核苷酸片段;以新型冠状病毒参考毒株基因组为参考基因组,所述引物22F3的序列包括与参考基因组第28778-28797位区域序列一致的序列;所述引物22B3的序列包括与参考基因组第28952-28971位区域序列反向互补的序列;22F2寡核苷酸片段包括与参考基因组第28809-28827位区域序列一致的序列;22F1c寡核苷酸片段包括与参考基因组第28866-28885位区域序列反向互补的序列;22B1c寡核苷酸片段包括与参考基因组第28889-28910位区域一致的序列;22B2寡核苷酸片段包括与参考基因组第28932-28951位区域序列反向互补的序列;
优选的:
引物22F3的核苷酸序列包括SEQ ID NO:1所示核苷酸序列;引物22B3的核苷酸序列包括SEQ ID NO:2所示核苷酸序列;引物22FIP的核苷酸序列包括SEQ ID NO:3所示核苷酸序列;引物22BTP的核苷酸序列包括SEQ TD NO:4所示核苷酸序列。
5.权利要求1-4任一项所述引物在制备检测新型冠状病毒的试剂盒中的应用。
6.一种用于检测新型冠状病毒的核苷酸片段、载体和/或菌株,其特征在于,所述核苷酸片段包括新型冠状病毒参考毒株核衣壳编码基因N序列,核苷酸片段的序列包括SEQ TDNO:11所示核苷酸序列;所述载体包括该核苷酸片段;所述菌株包括该核苷酸片段。
7.一种基于新型冠状病毒N基因的RNA阳性对照物,其特征在于,所述RNA阳性对照物包括权利要求6所述核苷酸片段通过体外转录获得的核糖核酸片段。
8.权利要求6或7所述核苷酸片段、载体、菌株和/或RNA阳性对照物在制备检测冠状病毒的试剂盒中的应用。
9.一种检测冠状病毒的试剂盒,其特征在于,包括权利要求1-4任一项所述引物;
优先的还包括:扩增反应缓冲液、dNTPs、Bst DNA聚合酶、反转录酶、对照标准品中的一种或几种。
10.一种制备检测冠状病毒试剂盒的方法,其特征在于,包括以下步骤:合成权利要求1-4任一项所述引物。
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